[發(fā)明專利]一種白酒糟中黃曲霉毒素B1的降解方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201711472042.5 | 申請日: | 2017-12-29 |
| 公開(公告)號: | CN108094712B | 公開(公告)日: | 2021-05-04 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 常敬華;何志明;欒雨婷;劉聰;項(xiàng)瑩 | 申請(專利權(quán))人: | 遼寧工程技術(shù)大學(xué) |
| 主分類號: | C12P1/02 | 分類號: | C12P1/02;A23K10/38;A23L5/20 |
| 代理公司: | 沈陽東大知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 21109 | 代理人: | 寧佳 |
| 地址: | 123000 遼*** | 國省代碼: | 遼寧;21 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 白酒 中黃 曲霉 毒素 b1 降解 方法 | ||
1. 一種白酒糟中黃曲霉毒素B1的降解方法,其特征在于,包括如下步驟:
步驟1,草菇菌種培養(yǎng)
(1)固體培養(yǎng)基培養(yǎng):將草菇菌種接種于PDA平板培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng),完成培養(yǎng),其中:所述的培養(yǎng)條件為:培養(yǎng)溫度為25~40℃,培養(yǎng)時(shí)間為3~8d;
(2)液體培養(yǎng)基培養(yǎng):
將PD液體培養(yǎng)基冷卻至室溫,將經(jīng)過固體培養(yǎng)基培養(yǎng)的草菇菌種接種于PD液體培養(yǎng)基內(nèi),進(jìn)行培養(yǎng),形成草菇培養(yǎng)液,備用;其中:所述的培養(yǎng)條件為:培養(yǎng)溫度25~40℃,培養(yǎng)時(shí)間3~8d,所述的草菇培養(yǎng)液孢子濃度105~107 cfu/mL;
(3)白酒糟中草菇培養(yǎng)液篩選:
取草菇培養(yǎng)液,加入白酒糟中進(jìn)行固態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)后,混勻,取培養(yǎng)后的混合物,加入蒸餾水混勻,形成稀釋后的混合物,離心后測上清液漆酶活性,篩選漆酶活性高于1800U/L的稀釋后的混合物,進(jìn)而篩選出滿足該培養(yǎng)稀釋后漆酶活性要求的草菇培養(yǎng)液,備用,其中,所述的白酒糟固體質(zhì)量與草菇培養(yǎng)液液體體積配比為(10~50):1,單位為g/mL,草菇培養(yǎng)液加入白酒糟后的培養(yǎng)條件為:培養(yǎng)溫度為25~35℃,培養(yǎng)時(shí)間為3~7d;
步驟2,白酒糟接種產(chǎn)毒黃曲霉
(1)產(chǎn)毒黃曲霉菌種活化與培養(yǎng):
取產(chǎn)毒黃曲霉菌種制備黃曲霉菌懸液,向PD培養(yǎng)液中加入黃曲霉菌懸液,培養(yǎng)至孢子濃度為105~107 cfu /mL,獲得黃曲霉培養(yǎng)液;
(2)白酒糟接種產(chǎn)毒黃曲霉:
向白酒糟中加入黃曲霉培養(yǎng)液,進(jìn)行培養(yǎng),并經(jīng)過滅菌處理,完成接種,其中:所述的白酒糟固體質(zhì)量與黃曲霉培養(yǎng)液液體體積添加配比為(5~20):1,單位為g:ml;
步驟3,白酒糟中黃曲霉毒素B1降解
取接種完成的白酒糟,向其中添加培養(yǎng)基成分,充分混勻后,接種篩選后的草菇培養(yǎng)液混勻,進(jìn)行培養(yǎng),完成白酒糟中黃曲霉毒素B1的降解;其中,所述的培養(yǎng)基成分包括碳源,氮源,無機(jī)鹽和微量元素;
所述的碳源為葡萄糖,所述的碳源添加質(zhì)量為接種完成白酒糟質(zhì)量的2~4%;
所述的氮源為蛋白胨,所述的氮源添加質(zhì)量為接種完成白酒糟質(zhì)量的1.5~2.5%;
所述的無機(jī)鹽為KH2PO4,所述的無機(jī)鹽添加質(zhì)量為接種完成白酒糟質(zhì)量的0.15~0.35%;
所述的微量元素為CuSO4,所述的微量元素添加質(zhì)量為接種完成白酒糟質(zhì)量的0.2~0.4mg/kg;
所述的接種完成的白酒糟固體質(zhì)量與篩選后的草菇培養(yǎng)液液體體積配比為(10~50):1,單位為g/mL,所述的培養(yǎng)條件為:溫度為25~28℃,時(shí)間8~20d。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的白酒糟中黃曲霉毒素B1的降解方法,其特征在于,所述的步驟2(1)中,所述的黃曲霉培養(yǎng)液培養(yǎng)過程在恒溫震蕩培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行,培養(yǎng)條件為:培養(yǎng)溫度30℃,培養(yǎng)時(shí)間7d,震蕩轉(zhuǎn)數(shù)為200rpm。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的白酒糟中黃曲霉毒素B1的降解方法,其特征在于,所述的步驟2(2)中,白酒糟加入黃曲霉培養(yǎng)液后的培養(yǎng)條件為:28℃,7d。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的白酒糟中黃曲霉毒素B1的降解方法,其特征在于,所述的步驟3中,所述的培養(yǎng)條件為:溫度為28℃,時(shí)間14d。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的白酒糟中黃曲霉毒素B1的降解方法,其特征在于,所述的步驟3中,接種完成的白酒糟經(jīng)過pH和含水量調(diào)節(jié)處理,pH調(diào)節(jié)為4.5~7,含水量調(diào)節(jié)為55~70%。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的白酒糟中黃曲霉毒素B1的降解方法,其特征在于,所述的步驟3中,所述的接種完成的白酒糟pH調(diào)節(jié)為6,含水量調(diào)節(jié)為65%。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的白酒糟中黃曲霉毒素B1的降解方法,其特征在于,所述的步驟3中,培養(yǎng)基添加質(zhì)量為:
碳源添加質(zhì)量為接種完成白酒糟質(zhì)量的3%;
氮源添加質(zhì)量為接種完成白酒糟質(zhì)量的1.5%;
無機(jī)鹽添加質(zhì)量為接種完成白酒糟質(zhì)量的0.15%;
微量元素添加質(zhì)量為接種完成白酒糟質(zhì)量的0.2mg/kg。
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