[發明專利]一種銀杏二萜內酯的提取分離方法

有效

• 申請號: 201711471575.1
• 申請日: 2017-12-29
• 公開（公告）號: CN107915742B
• 公開（公告）日: 2019-02-22
• 發明（設計）人: 蕭偉;周恩麗;康小東;王永香;殷洪梅;胡晗緋;吳云;王振中;章晨峰
• 申請（專利權）人: 江蘇康緣藥業股份有限公司
• 主分類號: C07D493/22
• 分類號: C07D493/22
• 代理公司: 北京律和信知識產權代理事務所(普通合伙) 11446
• 代理人: 劉國偉;王月春

本發明公開了一種銀杏二萜內酯的提取分離方法。該法包括：取銀杏葉，溶劑提取后，將提取液濃縮即得濃縮液；向該濃縮液加入吸附劑，并攪拌吸附，將含有吸附劑的藥液靜置，棄去上清液，收集吸附劑；向所述吸附劑加入溶劑加熱提取，將提取液濃縮冷藏；冷藏后的濃縮液離心，收集沉淀加水洗滌，所得沉淀再加入適當有機溶劑提取，濾過回收溶劑至干，得銀杏總內酯粗品；銀杏總內酯粗品加水洗滌，棄去水液，再加入有機溶劑進行重結晶，得銀杏二萜內酯精品。該提取方法工藝條件穩定，可得到組分相對固定的銀杏二萜內酯，銀杏酸含量低于2ppm，未檢出白果內酯。

技術領域

本發明涉及植物提取領域，具體涉及一種銀杏二萜內酯的提取分離方法。

背景技術

銀杏是地球上最古老的植物之一，具有獨特的藥理作用和臨床應用價值。自20世紀60年代開始，國外對銀杏的化學成分、藥理活性及臨床應用研究表明，銀杏藥用價值最大的部位是葉。銀杏葉及其制劑中最重要的活性成分是銀杏二萜內酯類化合物和黃酮類化合物。

銀杏二萜內酯類化合物是銀杏中獨有的一類罕見的天然化合物，迄今尚未發現存在于其他植物中。現代藥理學研究表明，銀杏二萜內酯對受體有強大的特異性抑制活性，是特異的血小板活化因子(PAF)拮抗劑，能抑制PAF引起健康人的血小板聚集和血栓素增加。PAF是一種可引起血小板聚集的可溶性磷脂類物質，同時也是目前為止發現的最強的脂質介質之一，在多種病理、生理過程中有關鍵作用。PAF發揮其生物學作用主要是通過PAF受體，PAF受體拮抗劑主要通過抑制PAF受體，拮抗PAF受體的生物學效應。銀杏二萜內酯是目前被認為最具有臨床應用前景的天然PAF受體拮抗劑。銀杏葉中有效活性的銀杏二萜內酯成分主要包括銀杏二萜內酯A、B、C、L、M、J、K，其中以銀杏二萜內酯A、B、C、K較為明顯，尤其在治療缺血性腦卒中方面具有獨特的優勢。銀杏二萜內酯B是一種公認的PAF受體拮抗劑，并具有明確的神經保護作用，可增強神經元的抑制活性，在癲癇、焦慮不安及其它許多疾病中有治療效果。并能影響內分泌系統及免疫與中樞神經系統的相互作用，且對大腦局部缺血有一定的作用。其次是銀杏二萜內酯 A和C。銀杏二萜內酯K為一種新單體，其結構與銀杏二萜內酯B相似。現代藥理學研究證實，銀杏二萜內酯K可以減輕腦缺血再灌注急性期神經損傷所導致的腦梗死，改善神經運動功能，減輕腦水腫程度。同時，銀杏二萜內酯K可以保護神經血管單元組分，減少神經元的丟失，抑制星形膠質細胞和小膠質細胞的活化與增值。

目前，關于銀杏二萜內酯類成分的相關制備及分離純化方法多樣、工藝復雜，生產成本高，制得的銀杏二萜內酯收率低，有效成分銀杏二萜內酯A、B、K提取得到的重量百分比也難以控制，組分比例的不固定帶來了療效上的不確定性，已有的提取方法，銀杏酸(據文獻“銀杏葉制劑中銀杏酚酸研究進展”報道，銀杏酸有強致敏性及細胞毒性。) 的含量也較高。例如“CN 1195665 A”銀杏內酯的提取方法和含有銀杏內酯的制劑中銀杏二萜內酯收率及純度均較低，銀杏酸含量偏高。

發明內容

本發明旨在現有的提取方法進行改進，旨在得到一種含有高純度、低銀杏酸的含銀杏二萜內酯A、B、K原料的提取分離方法，該方法可獲得含32-36％的銀杏內酯A、55-60％的銀杏內酯B、2.2-3.6％的銀杏內酯K的銀杏二萜內酯，且可有效控制該重量百分比含量，所述提取方法獲得提取物的銀杏酸含量低于2ppm。

有鑒于此，本發明提出了一種銀杏二萜內酯的提取分離方法，其特征在于，該方法在吸附、提取和純化、精制過程中采用攪拌的動態吸附，且在吸附后采用加熱的手段提取，并將提取物冷藏，在冷藏后濃縮離心等步驟。

該方法獲得含32-36％的銀杏內酯A、55-60％的銀杏內酯B、 2.2-3.6％的銀杏內酯K的銀杏二萜內酯組合物的可控性較好，可較好地控制銀杏二萜內酯組合物中活性成分的含量，有利于中藥標準化的質量控制。

具體而言，該方法包括：

A.提取：取銀杏葉，溶劑提取后，提取液濃縮即得濃縮液；