[發(fā)明專利]一種源自酪蛋白的抗氧化生物活性多肽MPFPK及其應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711469840.2
• 申請(qǐng)日: 2017-12-29
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108129562A
• 公開(kāi)（公告）日: 2018-06-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 戴智勇;李博;鄔娜;劉苗;張巖春;董玲
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 澳優(yōu)乳業(yè)（中國(guó)）有限公司
• 主分類號(hào): C07K14/47
• 分類號(hào): C07K14/47;C07K1/18;C12P21/06;A23L33/18;A61K38/17;A61P39/06
• 代理公司: 長(zhǎng)沙明新專利代理事務(wù)所(普通合伙) 43222
• 代理人: 徐新

一種源自酪蛋白的抗氧化生物活性多肽MPFPK及其應(yīng)用。本發(fā)明經(jīng)過(guò)廣泛而深入的研究，發(fā)現(xiàn)了本發(fā)明的生物活性肽MPFPK具有抗氧化生物學(xué)活性，主要表現(xiàn)為有效抑制低密度脂蛋白氧化；研究結(jié)果表明本發(fā)明中涉及的這種乳源性生物活性肽作為一類小分子物質(zhì)具有潛在的清除自由基、抑制脂荷泡沫細(xì)胞形成并延緩衰老的功能。對(duì)于開(kāi)發(fā)具有抗氧化功能，清除自由基，抑制低密度脂蛋白氧化等功能的乳制品、動(dòng)物飼料、保健品、保健食品及藥物具有十分重要的意義。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及蛋白領(lǐng)域，具體涉及一種源自酪蛋白的抗氧化生物活性多肽MPFPK及其應(yīng)用。

背景技術(shù)

動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis，AS)是心血管疾病的主要病理基礎(chǔ)，是指動(dòng)脈及其分支動(dòng)脈壁內(nèi)膜下脂質(zhì)沉積，內(nèi)膜灶狀纖維化，形成狀如粥樣物質(zhì)的斑塊，致使管壁變硬、管腔狹窄或破裂、血管阻塞，最后機(jī)體發(fā)生功能障礙，誘發(fā)一系列心腦血管疾病。AS及其并發(fā)癥嚴(yán)重危害著人類的健康，擁有極高的發(fā)病率和死亡率，而我國(guó)居民動(dòng)粥疾病已超過(guò)癌癥，成為中國(guó)死亡率最高的疾病。

到目前為止，AS的發(fā)病機(jī)制仍未完全清楚，涉及多種危險(xiǎn)因素，是一個(gè)多階段慢性血管壁病變的過(guò)程，存在多種病理學(xué)說(shuō)，其中“炎癥學(xué)說(shuō)”，“脂質(zhì)氧化學(xué)說(shuō)”被越來(lái)越多學(xué)者重視和認(rèn)同，炎癥介質(zhì)參與動(dòng)脈粥樣硬化整個(gè)發(fā)生發(fā)展過(guò)程，而低密度脂蛋白(lowdensity lipoprotein，LDL)氧化修飾產(chǎn)生的氧化型低密度脂蛋白(oxidized low densitylipoprotein，Ox-LDL)是AS發(fā)病形成過(guò)程的中心環(huán)節(jié)。天然的LDL主要功能是負(fù)責(zé)膽固醇的運(yùn)輸，其核心組分是膽固醇酯和甘油三酯，表面還存在游離膽固醇、磷脂和載脂蛋白B-100(apoB-100)等。而Ox-LDL誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷并致使其功能性紊亂，經(jīng)清道夫受體進(jìn)入巨噬細(xì)胞并進(jìn)行分化等一系列作用導(dǎo)致泡沫細(xì)胞的形成，促使血管平滑肌細(xì)胞的遷移和增殖，影響血小板粘附聚集等機(jī)制促進(jìn)AS的發(fā)生和發(fā)展。Khan等研究發(fā)現(xiàn)Ox-LDL參與并促進(jìn)了內(nèi)皮細(xì)胞的激活，是AS形成早期的一個(gè)重要事件。經(jīng)研究證實(shí)，Ox-LDL經(jīng)巨噬細(xì)胞的清道夫受體、CD36等受體識(shí)別并被大量吞噬攝取，造成細(xì)胞內(nèi)膽固醇大量積累，從而形成飽含脂質(zhì)的泡沫細(xì)胞，并沉積在血管壁上，慢慢堆積、鈣化，發(fā)展成為粥樣硬化斑塊，這是AS早期最明顯的病理特征。因?yàn)長(zhǎng)DL氧化成Ox-LDL促使動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展，這就給抗氧化劑抑制LDL氧化來(lái)防治動(dòng)脈粥樣硬化提供了理論依據(jù)。抗氧化劑可以分為合成抗氧化劑和天然抗氧化劑，而天然的抗氧化劑安全性更高，越來(lái)越受青睞。

從蛋白中提取的抗氧化活性肽，因其營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高、來(lái)源豐富及其自身的天然性和安全性而成為藥物和食品領(lǐng)域研究的熱點(diǎn)，在抑制LDL氧化方面具有很大的潛力。Ahn等從大馬哈魚(yú)蛋白酶解得到的肽組分具有抗氧化和抗炎的功能，抑制自由基和炎性因子的產(chǎn)生，保護(hù) Raw264.7巨噬細(xì)胞。王嬋制備了不同電荷性質(zhì)的酪蛋白抗氧化肽組分，各組分經(jīng)Caco-2細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)前后均可使LDL氧化時(shí)間延長(zhǎng)，尤其是堿性肽組分延滯時(shí)間最長(zhǎng)，具有較強(qiáng)的抑制LDL 氧化的能力。本發(fā)明從酪蛋白水解物中分離鑒定了2條抗氧化活性肽(MPFPK，KEMPFPK)對(duì) LDL氧化和泡沫細(xì)胞形成的顯著的抑制作用，可用于預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化的功能食品或保健品。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是，提供一種源自酪蛋白的抗氧化生物活性多肽MPFPK及其應(yīng)用。

本發(fā)明源自酪蛋白的抗氧化生物活性多肽MPFPK：

其中，M表示英文名稱Methionine，中文名稱為蛋氨酸(甲硫氨酸)的氨基酸的相應(yīng)殘基；P表示英文名稱Proline，中文名稱為脯氨酸的氨基酸的相應(yīng)殘基；F表示英文名稱Phenylalanine，中文名稱為苯丙氨酸的氨基酸的相應(yīng)的殘基；K表示英文名稱Lysine,中文名稱為賴氨酸的氨基酸的相應(yīng)的殘基。

本發(fā)明解決其技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案是：一種源自酪蛋白的抗氧化生物活性多肽 MPFPK，由以下步驟制備而成：