[發明專利]一種Hexon蛋白及其制備方法、單克隆抗體與試劑盒在審
| 申請號： | 201711464880.8 | 申請日： | 2017-12-28 |
| 公開（公告）號： | CN108456245A | 公開（公告）日： | 2018-08-28 |
| 發明（設計）人： | 任廣彩;王瀚;閆圓圓;黃妙容;詹烜子;陳瑞愛 | 申請（專利權）人： | 肇慶大華農生物藥品有限公司 |
| 主分類號： | C07K14/075 | 分類號： | C07K14/075;C12N15/70;C07K16/08 |
| 代理公司： | 廣州市越秀區哲力專利商標事務所(普通合伙) 44288 | 代理人： | 邵穗娟;湯喜友 |
| 地址： | 526000 *** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 蛋白 單克隆抗體 重組載體 試劑盒 制備 大腸桿菌偏愛密碼子 大腸桿菌 基因序列 表達量 誘導 優化 轉化 | ||
1.一種Hexon蛋白，其特征在于，所述Hexon蛋白是由重組載體轉化大腸桿菌誘導獲得的，所述重組載體包括經大腸桿菌偏愛密碼子優化的hexon基因序列。
2.如權利要求1所述的Hexon蛋白，其特征在于，所述優化的hexon基因序列如SEQ IDNo.1所示。
3.如權利要求1所述的Hexon蛋白，其特征在于，所述重組載體的載體為pET-30a(+)載體。
4.如權利要求1所述的Hexon蛋白，其特征在于，所述優化的hexon基因序列通過Ndel/Xhol酶切位點構建至pET-30a(+)載體。
5.一種Hexon蛋白的制備方法，其特征在于，包括：
基因優化步驟：對hexon基因序列進行大腸桿菌偏愛密碼子優化，得到優化的hexon基因序列；
制備載體步驟：將基因優化步驟得到的優化的hexon基因序列克隆到pET-30a(+)載體上，得到重組載體pET-30a-hexon；
誘導表達步驟：重組載體pET-30a-hexon轉化大腸桿菌，經IPTG于15℃誘導獲得Hexon蛋白。
6.如權利要求5所述的制備方法，其特征在于，基因優化步驟中，優化的hexon基因序列的序列如SEQ ID No.1所示。
7.如權利要求5所述的制備方法，其特征在于，制備載體步驟中，將優化的hexon基因序列克隆到pET-30a(+)載體中的Ndel/Xhol酶切位點。
8.如權利要求5所述的制備方法，其特征在于，誘導表達步驟后還包括Hexon蛋白的純化步驟：將誘導表達步驟誘導獲得的菌體用裂解液重懸后進行超聲處理，離心收集沉淀，用尿素進行溶解；用0.22μm的濾菌膜進行過濾除菌。
9.一種單克隆抗體，其特征在于，由權利要求1-4任一項所述的Hexon蛋白免疫小鼠獲得。
10.一種試劑盒，其特征在于，包含權利要求1-8任一項所述的Hexon蛋白。
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