[發(fā)明專利]一種熒光檢測(cè)試劑及制備方法及用于皮膚膽固醇的測(cè)量系統(tǒng)及方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711460983.7
• 申請(qǐng)日: 2017-12-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN108204963B
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-07-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉勇;王貽坤;倪敬書(shū);董美麗
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 安徽易康達(dá)光電科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N21/64
• 分類(lèi)號(hào): G01N21/64
• 代理公司: 北京科迪生專利代理有限責(zé)任公司 11251
• 代理人: 安麗

1.一種熒光檢測(cè)試劑，其特征在于：用于皮膚膽固醇的在體測(cè)量，所述熒光檢測(cè)試劑包括毛地黃皂苷和熒光基團(tuán)，二者之間通過(guò)一個(gè)10-20個(gè)原子的親水鏈連接，親水鏈一方面提高檢測(cè)試劑的水溶性，另一方面長(zhǎng)親水鏈的存在也會(huì)使熒光基團(tuán)的引入而不對(duì)毛地黃皂苷本身性質(zhì)造成影響；所述親水鏈為各種長(zhǎng)度的多乙二醇長(zhǎng)親水鏈；

所述熒光檢測(cè)試劑的制備如下：

（1）將熒光基團(tuán)和多乙二醇長(zhǎng)親水鏈在EDCI、DMAP、Et₃N和DCM存在條件下反應(yīng)得到中間產(chǎn)物一；

（2）將中間產(chǎn)物一和酸酐在THF存在條件下回流再得到中間產(chǎn)物二；

（3）將中間產(chǎn)物二和N-羥基丁二酰亞胺在EDCI和DCM存在條件下反應(yīng)得到中間產(chǎn)物三；

（4）將中間產(chǎn)物三和毛地黃皂苷在Et₃N和THF存在條件下反應(yīng)得到熒光檢測(cè)試劑。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的熒光檢測(cè)試劑，其特征在于：所述親水鏈連接的熒光基團(tuán)被特定波長(zhǎng)的激發(fā)光激發(fā)，被激發(fā)后的熒光可反映所結(jié)合的皮膚膽固醇含量。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的熒光檢測(cè)試劑，其特征在于：所述熒光基團(tuán)必須含有至少一個(gè)羧基，用以和親水鏈結(jié)合。

4.采用權(quán)利要求1-3任一所述熒光檢測(cè)試劑的皮膚膽固醇熒光測(cè)量系統(tǒng)，包括：熒光檢測(cè)試劑、檢測(cè)設(shè)備和檢測(cè)材料，其特征在于：

所述檢測(cè)材料包括限位墊片、試劑吸取管和試劑移除棒；

所述限位墊片是一面帶有固定膠、中間帶有檢測(cè)孔的軟片，粘貼在皮膚待檢測(cè)區(qū)域，中間的檢測(cè)孔用以限定檢測(cè)區(qū)域；

所述試劑吸取管用以吸取一定體積的熒光檢測(cè)試劑置于檢測(cè)孔；

所述試劑移除棒是用以將反應(yīng)后的熒光檢測(cè)試劑從檢測(cè)孔移除。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的皮膚膽固醇熒光測(cè)量系統(tǒng)，其特征在于：所述檢測(cè)設(shè)備包括：電源、控制模塊、光源、準(zhǔn)直透鏡、濾光片、檢測(cè)池、光纖、光譜儀和上位機(jī)；

所述電源用以為系統(tǒng)供電；

所述控制模塊用以控制光源的強(qiáng)度；

所述光源根據(jù)熒光檢測(cè)試劑上連接的熒光基團(tuán)的激發(fā)光選擇，如果熒光檢測(cè)試劑連接的熒光基團(tuán)為紫外激發(fā)，則所述光源模塊為紫外LED光源，激發(fā)帶寬為350-390 nm,中心波長(zhǎng)為370 nm；

所述檢測(cè)池為可適配限位墊片的檢測(cè)小孔，孔內(nèi)內(nèi)置一個(gè)探頭；

所述光纖總共有兩根，集成在所述探頭里面，一根與所述光源連接，引導(dǎo)光路至檢測(cè)部位；另一根與所述光譜儀連接，將激發(fā)的熒光信息收集至光譜儀；

所述光譜儀模塊用以接受被激發(fā)的熒光光譜信息；

所述上位機(jī)模塊用以接收光譜儀的光譜信息，并對(duì)光譜信息進(jìn)行分析，得出皮膚膽固醇的含量。

6.采用權(quán)利要求1-3任一所述熒光檢測(cè)試劑的皮膚膽固醇熒光測(cè)量方法，其特征在于步驟如下：

（1）在進(jìn)行測(cè)量之前，需將待測(cè)量部位清理干凈，此處采用水洗或異丙醇擦拭的方式進(jìn)行；

（2）等待檢測(cè)部位晾干后，貼上限位墊片，將限位墊片置于檢測(cè)設(shè)備中的檢測(cè)池，進(jìn)行背景熒光測(cè)量；

（3）待背景熒光測(cè)量完成以后，用所述試劑吸取管吸取熒光檢測(cè)試劑置于限位墊片的檢測(cè)孔，反應(yīng)1min后用所述試劑移除棒移除多余的熒光檢測(cè)試劑；

（4）將粘貼限位墊片的檢測(cè)部位再置于檢測(cè)設(shè)備中的檢測(cè)池，進(jìn)行皮膚表面膽固醇熒光測(cè)量，測(cè)量后，經(jīng)上位機(jī)處理以后即可實(shí)時(shí)得出皮膚表面膽固醇的含量。