[發(fā)明專利]小麥赤霉病谷粒菌種制作及使用方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711459576.4
• 申請日: 2017-12-28
• 公開（公告）號: CN108277165B
• 公開（公告）日: 2021-06-25
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張曉軍;閻曉濤;田志剛;李光蓉;暢志堅;李欣;郭慧娟;喬麟軼;任永康;車麗;高偉;秦秀珍
• 申請（專利權(quán)）人: 山西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院作物科學(xué)研究所
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12R1/77
• 代理公司: 太原科衛(wèi)專利事務(wù)所(普通合伙) 14100
• 代理人: 朱源

本發(fā)明涉及植物真菌病害病原菌培養(yǎng)，具體為小麥赤霉病谷粒菌種制作及使用方法，解決現(xiàn)有接菌鑒定方法需培養(yǎng)菌液，方法復(fù)雜，菌液不能長期存放，接菌成功率低的問題，谷粒菌種制備：帶殼谷粒泡5%綠豆水保持60%持水率，分裝入袋輕壓緊密，封口制菌筒，高溫高壓滅菌晾至室溫，兩端接菌黑暗恒溫通風(fēng)高濕度培養(yǎng)，轉(zhuǎn)移至透氣紙袋，壓散陰涼通風(fēng)晾干封口袋中低溫避光保存。使用方法：先檢測活性，抽穗后揚(yáng)花前基部小穗側(cè)小花內(nèi)稃接菌，包裹保濕至外稃變褐取下包裹層，高濕度彌霧保濕28天。優(yōu)點：1、菌種可長期保存；2、一次制作，多次使用，用量少，便于運(yùn)輸；3、接菌方法簡單高效，發(fā)病率高，抗病性鑒定結(jié)果準(zhǔn)確。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及植物真菌病害病原菌培養(yǎng)，具體為小麥赤霉病谷粒菌種制作及使用方法。

背景技術(shù)

小麥赤霉病（Fusarium head blight，F(xiàn)HB）是由禾谷鐮刀菌（Fusariumgraminearum）引起的嚴(yán)重危害小麥穗部及籽粒的一種毀滅性病害，主要發(fā)生于長江中下游、淮河流域冬麥區(qū)和東北春麥區(qū)等潮濕及半潮濕地區(qū)。病害流行年份，可造成小麥70%-100%的產(chǎn)量損失，經(jīng)赤霉菌感染的小麥病粒，含有多種毒素，尤其是DON毒素，對人和動物均有很強(qiáng)的毒性，能引起人和動物嘔吐、腹瀉、皮膚刺激、拒食、神經(jīng)紊亂、流產(chǎn)、死胎等。當(dāng)病麥率達(dá)到4%以上時，即不能食用，失去商品價值。

近年來，隨著全球氣候變暖加劇以及耕作制度的變化，厄爾尼諾和拉尼娜事件交替出現(xiàn)，極端天氣頻發(fā)，小麥赤霉病逐漸由偶發(fā)病害上升為常發(fā)病害，發(fā)生面積也不斷擴(kuò)大，赤霉病已由常發(fā)的長江中下游麥區(qū)擴(kuò)展到黃淮麥區(qū)和華北麥區(qū)，淮河流域麥區(qū)已經(jīng)成為受赤霉病為害最嚴(yán)重的地區(qū)之一。但世界上尚無防治赤霉病的有效方法，也未研制出能夠徹底防治小麥赤霉病的化學(xué)藥劑，因此，選育與推廣抗赤霉病品種就成為目前控制與預(yù)防小麥赤霉病最為經(jīng)濟(jì)環(huán)保的途徑。

接菌鑒定是選育小麥抗赤霉病品種的重要手段，常用的方法有單花滴注法、菌液噴霧法、土表接菌法等，這幾種方法各有優(yōu)缺點。單花滴注法接菌精確，能夠保證接菌成功率，可進(jìn)行定性定量鑒定；但在接菌前需要進(jìn)行菌液培養(yǎng)，所需設(shè)備較為復(fù)雜，對環(huán)境及培養(yǎng)條件要求嚴(yán)格，每次接菌前需要在顯微鏡下檢測活菌數(shù)目，且培養(yǎng)好的菌液不能長期存放，極易喪失活性，因此對于赤霉病的鑒定極為不便。菌液噴霧法接菌方便，利于進(jìn)行大面積、成規(guī)模接菌鑒定；但同樣需要在每次接菌前培養(yǎng)菌液，并在顯微鏡檢測活菌數(shù)目，菌液保存不便及保存時間短，接菌成功率較低。土表接菌法采用谷物類籽粒培養(yǎng)菌種，灑于土表后依靠孢子彈射自然發(fā)病，對環(huán)境要求較高，接菌成功率較低，難以對小麥品種進(jìn)行定性定量鑒定。

因此，研究一種制作、使用方法簡單，接菌成功率高，可長期保存的小麥赤霉病谷粒及使用方法是很有必要的。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明解決目前現(xiàn)有的接菌鑒定方法需培養(yǎng)菌液，且制備方法復(fù)雜，培養(yǎng)好的菌液不能長期存放，接菌成功率低的問題，提供一種制備方法簡單、無需培養(yǎng)菌液，制備好的谷粒可以長期保存而不喪失活性，接菌成功率高的小麥赤霉病谷粒菌種制作及使用方法。

本發(fā)明是通過以下操作步驟實現(xiàn)的：小麥赤霉病谷粒菌種制作方法，包括以下操作步驟：

a、準(zhǔn)備新鮮飽滿，無蟲蛀及發(fā)霉的綠豆50g，加入純凈水1200ml，置于火上燒開，水沸騰后熬制15-20min，在綠豆剛剛開花的時候關(guān)火，用細(xì)紗布濾去綠豆殘渣，僅保留綠豆水，補(bǔ)充純凈水至1000ml，配制成5%的綠豆水，備用；

b、準(zhǔn)備干燥、無霉變、去凈浮皮、碎渣的新鮮帶殼谷粒1kg，置于干凈容器中，加入溫?zé)岬?%綠豆水，充分?jǐn)嚢枋构攘Ｍ耆珴駶櫍由w保濕4小時，使谷粒充分吸水；

c、濾去多余水分，將浸泡好的谷粒在陰涼通風(fēng)處攤開晾干30min，使谷粒持水率達(dá)到約60%左右，用手捏不成團(tuán)即可；

d、將處理好的谷粒分裝到耐高溫高壓聚丙烯滅菌袋中，每袋分裝300-500g，輕壓使其保持較為緊密的狀態(tài)；