[發明專利]發熱伴血小板減少綜合征病毒糖蛋白定量檢測試劑盒

有效

• 申請號: 201711459224.9
• 申請日: 2017-12-28
• 公開（公告）號: CN108178796B
• 公開（公告）日: 2019-03-19
• 發明（設計）人: 朱鳳才;曾曉燕;焦永軍;史鳳娟;劉靜嫻;史智揚
• 申請（專利權）人: 江蘇省疾病預防控制中心
• 主分類號: C07K16/10
• 分類號: C07K16/10;G01N33/569;G01N33/577
• 代理公司: 北京中譽威圣知識產權代理有限公司 11279
• 代理人: 朱萍;孟祥斌

本發明公開了一種可定量檢測發熱伴血小板減少綜合征病毒糖蛋白的試劑盒，該試劑盒包括針對發熱伴血小板減少綜合征病毒糖蛋白Gc的兩個單克隆抗體，通過雙抗體夾心ELISA法實現檢測發熱伴血小板減少綜合征病毒糖蛋白的目的。本發明的檢測試劑盒檢測濃度范圍大，靈敏度高，特異性強，檢測成本低，使用方便，適于在疫苗生產領域或臨床診斷上推廣。

技術領域

本發明屬于生物醫學領域，涉及一種發熱伴血小板減少綜合征病毒糖蛋白定量檢測試劑盒。

背景技術

發熱伴血小板減少綜合征病毒(severe fever with thrombocytopeniasyndrome virus，SFTSV)是近年來在我國中東部地區流行的一類新型出血熱病毒。該病毒通過蜱蟲(長角血蜱，H.longicornis)叮咬的方式感染人及動物，亦可通過密切接觸引起人際傳播，給罹患地區造成巨大的生命、財產損失。目前我國已有17個省(市、自治區)確認了該病毒的流行，中國鄰國日本、韓國等亦有人感染該病毒的報道。

SFTSV在分類學上屬于布尼亞病毒科、白蛉病毒屬，其基因組由大(L)、中(M)、小(S)三個單股負鏈RNA片段組成，與布尼亞病毒科其他病毒相似，病毒基因組3′末端和5′末端序列互補。L片段編碼RNA依賴的RNA聚合酶；M片段編碼糖蛋白前體，翻譯后經宿主細胞內蛋白酶的修飾形成Gn和Gc兩個糖蛋白；S片段屬雙義RNA，分別編碼核衣殼蛋白NP和非結構蛋白NSs。

對于該病毒引起的自然疫源性疾病的預防，除了實施滅蜱、加強病例監測等策略外，對生活在疫區的易感人群進行有效的疫苗接種是最為根本的手段。SFTSV滅活疫苗目前正在研發過程中，而對該疫苗中的有效成分-病毒顆粒囊膜上糖蛋白(Gn和Gc)的實時動態、定量監測是該疫苗研發過程中一重大技術關鍵。

本發明專利描述了一種基于雙抗體夾心ELISA來定量檢測病毒培養上清液中Gc糖蛋白的含量。由于在病毒囊膜上Gn和Gc兩種糖蛋白的摩爾數比為1:1，且二者的分子量也大體相當，因此通過對Gc糖蛋白的檢測即可獲得整個糖蛋白的 含量。

發明內容

本發明的目的之一在于提供一種發熱伴血小板減少綜合征病毒糖蛋白定量檢測試劑盒。

本發明的目的之二在于提供上述發熱伴血小板減少綜合征病毒糖蛋白定量檢測試劑盒中的包被抗體和檢測抗體。

本發明的目的之三在于提供一種利用上述試劑盒檢測發熱伴血小板減少綜合征病毒中糖蛋白的方法。

為了實現上述目的，本發明采用了如下技術方案：

本發明提供了一種針對發熱伴血小板減少綜合征病毒糖蛋白Gc的單克隆抗體，所述單克隆抗體包括：

輕鏈可變區具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列或與其具有至少80％同源性的氨基酸序列；

重鏈可變區具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列或與其具有至少80％同源性的氨基酸序列；該單克隆抗體命名為1C5-F5。

優選地，1C5-F5抗體的輕鏈可變區具有SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列，重鏈可變區具有SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。

本發明提供了一種針對發熱伴血小板減少綜合征病毒糖蛋白Gc的單克隆抗體，所述單克隆抗體包括：

輕鏈可變區具有SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列或與其具有至少80％同源性的氨基酸序列；

重鏈可變區具有SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列或與其具有至少80％同源性的氨基酸序列；該單克隆抗體命名為1H6-B10。

優選地，1H6-B10抗體的輕鏈可變區具有SEQ ID NO:4所示的氨基酸序列，重鏈可變區具有SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列。