[發明專利]用于生活污水處理的含有脂肪酶基因的重組工程菌及其構建方法有效
| 申請號： | 201711458989.0 | 申請日： | 2017-12-28 |
| 公開（公告）號： | CN108251345B | 公開（公告）日： | 2021-07-20 |
| 發明（設計）人： | 謝悅波;姚竣耀;劉才群 | 申請（專利權）人： | 江蘇世邦生物工程科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N1/21 | 分類號： | C12N1/21;C12N15/70;C12N15/62;C07K19/00;C02F3/34;C12N11/02;C02F101/16 |
| 代理公司： | 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 王艷 |
| 地址： | 211800 江蘇省南京市*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 用于 生活 污水處理 含有 脂肪酶 基因 重組 工程 及其 構建 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種生活污水處理方法，其特征在于，包括以下步驟：
1）重組工程菌株BL21- pCAMBIA1301-sole-LIPY7進行誘導表達獲得菌液；
2）脂肪酶LIPY7的純化和固定化；
3）將固定化脂肪酶LIPY7進行生活污水處理；
所述重組工程菌BL21- pCAMBIA1301-sole-LIPY7的構建方法包括：將融合基因sole-LIPY7導入表達載體pCAMBIA1301中獲得重組表達載體pCAMBIA1301-sole-LIPY7；將重組表達載體pCAMBIA1301-sole-LIPY7轉化到大腸桿菌BL21中，挑取陽性克隆LB培養基中過夜培養得到重組工程菌株BL21- pCAMBIA1301-sole-LIPY7，所述融合基因sole-LIPY7的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；
所述脂肪酶LIPY7的純化和固定化步驟為：將步驟1）誘導后的菌液加入磷酸緩沖液，超聲波處理，然后加入大豆卵磷脂和橄欖油混勻，再超聲波處理，冰上放置然后超聲波處理，冰上放置，然后離心收集上層油體即為固定化脂肪酶LIPY7；
所述超聲波的功率為30W、破碎時間為8s、間隔時間為8s，每次超聲20個循環；所述污水處理環境溫度為45℃，所述生活污水的pH為8.0。
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