[發(fā)明專利]一種用于CLB檢測(cè)的電化學(xué)免疫傳感器及制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711457467.9
• 申請(qǐng)日: 2017-12-28
• 公開（公告）號(hào): CN108169473B
• 公開（公告）日: 2020-07-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李朝睿;紀(jì)人月;邱景富
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 重慶醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N33/53
• 分類號(hào): G01N33/53;G01N27/327
• 代理公司: 上海光華專利事務(wù)所(普通合伙) 31219
• 代理人: 周建軍

本發(fā)明提供一種用于CLB檢測(cè)的電化學(xué)免疫傳感器及制備方法，該電化學(xué)免疫傳感器具有基于MoS₂?AuPt納米復(fù)合物和生物素?鏈霉親和素系統(tǒng)的工作電極，本發(fā)明所提出的電化學(xué)免疫傳感器具有良好的靈敏度(檢測(cè)限為6.86pg·mL^?1)，高特異性，可接受的重復(fù)性，同時(shí)也可用于實(shí)際豬肉樣品中的檢測(cè)。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種用于CLB檢測(cè)的電化學(xué)免疫傳感器及制備方法。

背景技術(shù)

克倫特羅(CLB)是β-激動(dòng)劑家族的擬交感神經(jīng)胺，用作哮喘的支氣管溶解藥物，特別是在慢性病的情況下。當(dāng)用作食品生產(chǎn)動(dòng)物的食品添加劑時(shí)，CLB還可以促進(jìn)肌肉生長(zhǎng)并降低脂肪含量。因此，CLB被稱為“瘦肉精”。為了經(jīng)濟(jì)效益，許多生產(chǎn)者非法將CLB添加到牲畜飼料中以增加瘦肉的產(chǎn)量。然而，CLB半衰期長(zhǎng)，在家畜體內(nèi)代謝緩慢。如果人長(zhǎng)期服用含有CLB的肉類，特別是兒童和老人，則會(huì)出現(xiàn)相應(yīng)的臨床癥狀和體征，如肌肉震顫、青光眼、精神焦慮、心悸，甚至死亡。為了公共衛(wèi)生和食品安全，許多國(guó)家頒布法律禁止使用CLB作為家畜食品添加劑。因此，一個(gè)高靈敏度和特異性的克倫特羅檢測(cè)方法對(duì)于研究和臨床診斷都非常有意義。

發(fā)明內(nèi)容

鑒于以上所述現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)，本發(fā)明的目的在于提供一種用于CLB檢測(cè)的電化學(xué)免疫傳感器及制備方法，用于解決現(xiàn)有技術(shù)中對(duì)克倫特羅CLB的檢測(cè)限不夠低、響應(yīng)時(shí)間長(zhǎng)、成本較高、靈敏度差等問題。

為實(shí)現(xiàn)上述目的及其他相關(guān)目的，本發(fā)明第一方面提供一種用于CLB檢測(cè)的工作電極，包括基底電極，所述基底電極上修飾有L-半胱氨酸功能化的MoS₂、AuPt納米復(fù)合物、鏈霉親和素水溶液、生物素標(biāo)記抗體CLB。

在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述基底電極為玻碳電極。

在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述工作電極上還孵育有待檢測(cè)樣品。

本發(fā)明第二方面提供具有上述工作電極的電化學(xué)免疫傳感器。

在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，所述電化學(xué)免疫傳感器還包括參比電極、對(duì)電極。

本發(fā)明第三方面提供上述用于CLB檢測(cè)的工作電極的制備方法，包括如下步驟：

(1)在基底電極表面滴加L-半胱氨酸功能化的MoS₂，再將MoS₂修飾的電極浸泡在含有AuPt納米復(fù)合物的水溶液中，電沉積，使得金鉑納米顆粒(AuPt-NPs)固定在被MoS₂修飾的電極表面；

(2)將鏈霉親和素水溶液、生物素標(biāo)記抗體CLB水溶液滴加至修飾電極表面，孵育，反應(yīng)結(jié)束后，滴加BSA水溶液，孵育，得到所述基于MoS₂-AuPt納米復(fù)合物和生物素-鏈霉親和素系統(tǒng)的工作電極。

在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，步驟(1)中，L-半胱氨酸功能化的MoS₂的制備方法如下：將MoS₂粉末分散于水中，再與L-半胱氨酸水溶液混合，離心清洗后，反應(yīng)得到MoS₂。

在本發(fā)明的一些實(shí)施例中，MoS₂粉末分散于水中，形成的MoS₂水溶液濃度為0.5-2.5mg/mL。

優(yōu)選地，MoS₂水溶液濃度為1.0-2.5mg/mL。

更優(yōu)選地，MoS₂水溶液濃度為1.5-2.5mg/mL。

更優(yōu)選地，MoS₂水溶液濃度為1.5mg/mL。