[發明專利]一種用于CLB檢測的電化學免疫傳感器及制備方法

有效

• 申請號: 201711457467.9
• 申請日: 2017-12-28
• 公開（公告）號: CN108169473B
• 公開（公告）日: 2020-07-31
• 發明（設計）人: 李朝睿;紀人月;邱景富
• 申請（專利權）人: 重慶醫科大學
• 主分類號: G01N33/53
• 分類號: G01N33/53;G01N27/327
• 代理公司: 上海光華專利事務所(普通合伙) 31219
• 代理人: 周建軍

1.一種用于CLB檢測的工作電極，其特征在于：包括基底電極，所述基底電極上修飾有L-半胱氨酸功能化的MoS₂、AuPt納米復合物、鏈霉親和素水溶液、生物素標記CLB抗體；所述基底電極為玻碳電極；

所述工作電極的制備方法包括如下步驟：

（1）將MoS₂粉末分散于水中，形成濃度為0.5-2.5mg/mL的MoS₂水溶液，再與L-半胱氨酸水溶液混合，離心清洗后，反應得到L-半胱氨酸功能化的MoS₂；將Na₂SO₄水溶液分別加入HAuCl₄水溶液和H₂PtCl₆水溶液中，再混合該兩種溶液，形成體積比為1：1的混合溶液，反應得到含有AuPt納米復合物的水溶液；在基底電極表面滴加L-半胱氨酸功能化的MoS₂，再將MoS₂修飾的電極浸泡在含有AuPt納米復合物的水溶液中，電沉積，電沉積時間為10-60s，使得金鉑納米顆粒（AuPt-NPs）固定在被MoS₂修飾的電極表面；

（2）將濃度為0.5-2.0μg/mL的鏈霉親和素水溶液、濃度為1-6μg/mL的生物素標記CLB抗體水溶液滴加至修飾電極表面，孵育，反應結束后，滴加BSA水溶液，孵育，得到基于MoS₂-AuPt納米復合物和生物素-鏈霉親和素系統的工作電極。

2.根據權利要求1所述的工作電極，其特征在于：所述工作電極上還孵育有待檢測樣品。

3.根據權利要求1所述的工作電極，其特征在于：步驟（1）中，所述MoS₂水溶液濃度為1.0-2.5mg/mL；

和/或，步驟（1）中，所述HAuCl₄水溶液的濃度、H₂PtCl₆水溶液的濃度均為5mg/mL，體積均為1mL，所述HAuCl₄水溶液、H₂PtCl₆水溶液中分別加入濃度為0.2mol/L的Na₂SO₄水溶液0.5mL；

和/或，步驟（1）中，電沉積時間為30-50s；

和/或，步驟（2）中，鏈霉親和素水溶液的濃度為1.0-2.0μg/mL；

和/或，步驟（2）中，生物素標記CLB抗體水溶液的濃度為4-6μg/mL。

4.具有權利要求1或2所述工作電極的電化學傳感器。

5.一種用于CLB檢測的工作電極的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

（1）將MoS₂粉末分散于水中，形成濃度為0.5-2.5mg/mL的MoS₂水溶液，再與L-半胱氨酸水溶液混合，離心清洗后，反應得到L-半胱氨酸功能化的MoS₂；將Na₂SO₄水溶液分別加入HAuCl₄水溶液和H₂PtCl₆水溶液中，再混合該兩種溶液，形成體積比為1：1的混合溶液，反應得到含有AuPt納米復合物的水溶液；在基底電極表面滴加L-半胱氨酸功能化的MoS₂，再將MoS₂修飾的電極浸泡在含有AuPt納米復合物的水溶液中，電沉積，電沉積時間為10-60s，使得金鉑納米顆粒（AuPt-NPs）固定在被MoS₂修飾的電極表面；

（2）將濃度為0.5-2.0μg/mL的鏈霉親和素水溶液、濃度為1-6μg/mL的生物素標記CLB抗體水溶液滴加至修飾電極表面，孵育，反應結束后，滴加BSA水溶液，孵育，得到基于MoS₂-AuPt納米復合物和生物素-鏈霉親和素系統的工作電極。

6.根據權利要求5所述的制備方法，其特征在于，步驟（1）中，所述MoS₂水溶液濃度為1.0-2.5mg/mL。