[發(fā)明專利]一種獨(dú)一味藥材及其制劑的UPLC指紋圖譜檢測方法

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• 申請日: 2017-12-28
• 公開（公告）號: CN109975439A
• 公開（公告）日: 2019-07-05
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 鄧蕓;黃勝;葉惠煊;周良;袁利群
• 申請（專利權(quán)）人: 九芝堂股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發(fā)明公開了一種獨(dú)一味藥材及其制劑的UPLC指紋圖譜檢測方法，方法包括：(a)對照品溶液的制備；(b)供試品溶液的制備；(c)UPLC檢測條件；(d)以胡麻屬苷、咖啡酸、綠原酸、山梔苷甲酯、馬錢苷、8?O?乙酰山梔苷甲酯、連翹酯苷B、木犀草苷、毛蕊花糖苷、異毛蕊花糖苷等為參照峰的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的制定；(e)指紋圖譜的質(zhì)量控制。該方法供試液制備提取溶劑環(huán)保，方法簡單，不僅較傳統(tǒng)HPLC方法更為簡便迅速、節(jié)能減耗，且所得的獨(dú)一味藥材及制劑指紋圖譜中各特征峰分離效果較好，特征性成分及藥效成分保留完整，重復(fù)性、穩(wěn)定性良好，精密度高，專屬性強(qiáng)。本法能夠準(zhǔn)確、快速控制獨(dú)一味藥材及其制劑。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種中藥材及其制劑的UPLC指紋圖譜技術(shù)領(lǐng)域，尤其是獨(dú)一味藥材及其制劑的UPLC指紋圖譜檢測方法。

背景技術(shù)

UPLC技術(shù)是完全基于HPLC基本原理的技術(shù)，是以亞二微米小顆粒、超高柱效的填料為核心的技術(shù)。目前在中藥及中成藥領(lǐng)域，UPLC的使用正在走向成熟。其與HPLC相比，既保留了高效液相色譜的所有優(yōu)點(diǎn)，且具有省時、節(jié)能、環(huán)保的獨(dú)特優(yōu)勢。

獨(dú)一味藥材為唇形科植物獨(dú)一味Lamiophlomis Rotata(Benth.)Kudo的干燥地上部分，是藏族、蒙古族、納西族等民族用于止血、鎮(zhèn)痛等的常用藥。目前獨(dú)一味廣泛分布在甘肅、四川、云南、西藏、青海、內(nèi)蒙古等地。其性甘、苦，平；歸肝經(jīng)。具有活血止血，祛風(fēng)止痛的功效；常用于跌打損傷，外傷出血，風(fēng)濕痹痛，黃水病。目前市面上以獨(dú)一味藥材入藥的單味藥制劑多數(shù)為止血鎮(zhèn)痛抗炎的良藥：如成都九芝堂金鼎藥業(yè)有限公司止血鎮(zhèn)痛膠囊；甘肅康縣獨(dú)一味生物制藥有限責(zé)任公司的獨(dú)一味片、獨(dú)一味膠囊、獨(dú)一味軟膠囊。

目前已有相關(guān)報道以UPLC技術(shù)對獨(dú)一味藥材及其制劑進(jìn)行含量測定、以HPLC技術(shù)對獨(dú)一味藥材及其制劑進(jìn)行指紋圖譜質(zhì)量控制，然而，未有采用UPLC法對獨(dú)一味藥材及其制劑進(jìn)行指紋圖譜質(zhì)量控制的方法，且現(xiàn)有技術(shù)中最多同時檢測獨(dú)一味藥材中的8種成分，本法應(yīng)用UPLC技術(shù)以盡快的速度保留獨(dú)一味藥材及其制劑盡可能多的有效成分，并測定了獨(dú)一味藥材中10個指標(biāo)性成分、獨(dú)一味制劑中9個指標(biāo)性成分，分別建立其標(biāo)準(zhǔn)圖譜，對獨(dú)一味藥材及其制劑的快速鑒別有重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供一種高效準(zhǔn)確、簡單迅速檢測獨(dú)一味藥材及其制劑的UPLC指紋圖譜檢測方法及其指紋圖譜，利用該圖譜可快速簡便地監(jiān)控獨(dú)一味藥材及其制劑的質(zhì)量。本發(fā)明技術(shù)方案如下：

一種獨(dú)一味藥材及其制劑的UPLC指紋圖譜檢測方法及其指紋圖譜，包括如下步驟：

(1)對照品溶液的制備：

分別稱取胡麻屬苷、咖啡酸、綠原酸、山梔苷甲酯、馬錢苷、8-O-乙酰山梔苷甲酯、連翹酯苷B、木犀草苷、毛蕊花糖苷、異毛蕊花糖苷對照品，置于容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，搖勻，制成對照品溶液；

(2)供試品溶液的制備：

分別稱取獨(dú)一味藥材、獨(dú)一味制劑粉末(過四號篩)，置具塞三角錐形瓶中，加乙醇或10～50％甲醇或水，稱重，回流提取45～75min，放冷，再稱定重量，用同種溶劑補(bǔ)重，搖勻，用微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，即分別得到獨(dú)一味藥材及其制劑供試品溶液；

(3)UPLC檢測：

色譜條件為：色譜柱為C₁₈反相色譜柱(2.1×150mm,1.7μm)；柱溫為30～40℃；檢測波長為235nm；流動相A為乙腈，流動相B為0.1％～0.5％甲酸溶液，梯度洗脫，總流速為0.3～0.6ml/min，分析時間62分鐘；所述梯度洗脫順序表如下：

表1 梯度洗脫順序表

(4)以8-O-乙酰山梔苷甲酯為參照峰的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的制定