[發(fā)明專利]檢測(cè)培養(yǎng)基以及復(fù)合微生態(tài)制劑中乳酸菌總數(shù)的檢測(cè)方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711452460.8
• 申請(qǐng)日: 2017-12-26
• 公開（公告）號(hào): CN108085362A
• 公開（公告）日: 2018-05-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 吳微;張茜茜;詹志春;周櫻;諶頡
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 武漢新華揚(yáng)生物股份有限公司;湖北華揚(yáng)科技發(fā)展有限公司
• 主分類號(hào): C12Q1/06
• 分類號(hào): C12Q1/06;C12Q1/04
• 代理公司: 北京超凡志成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11371
• 代理人: 王闖

本發(fā)明提供了一種檢測(cè)培養(yǎng)基以及復(fù)合微生態(tài)制劑中乳酸菌總數(shù)的檢測(cè)方法，涉及微生物檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。該檢測(cè)培養(yǎng)基按重量份數(shù)計(jì)，其組分按重量份數(shù)計(jì)包括：牛肉浸粉5?10份、酵母浸粉5?8份、麥芽糖5?20份、硫酸鎂0.1?0.3份、乙酸鈉3?5份、檸檬酸銨10?20份、硫酸錳0.05?0.1份、山梨酸鉀0.2?0.8份、谷氨酸鈉1?5份、瓊脂粉15?20份以及蒸餾水1000份；檢測(cè)培養(yǎng)基的pH值為5.5?7.0。本發(fā)明通過對(duì)檢測(cè)培養(yǎng)基進(jìn)行改良，起到抑制復(fù)合微生態(tài)制劑中酵母類微生物，而不影響乳酸菌的生長(zhǎng)的作用，進(jìn)而達(dá)到準(zhǔn)確檢測(cè)乳酸菌總數(shù)的目的。此外，該檢測(cè)方法簡(jiǎn)單，有利于快速檢測(cè)結(jié)果。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及微生物檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，涉及一種檢測(cè)培養(yǎng)基以及復(fù)合微生態(tài)制劑中乳酸菌總數(shù)的檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

微生態(tài)制劑作為一種飼料添加劑，已經(jīng)廣泛運(yùn)用至畜牧業(yè)和養(yǎng)殖業(yè)。為了改善動(dòng)物腸道環(huán)境，減少抗生素的使用，常用的微生態(tài)制劑已經(jīng)不再是單一的微生態(tài)產(chǎn)品，而是更多的采用兩種或者兩種以上的益生菌復(fù)合配制的微生態(tài)產(chǎn)品。其中就包括乳酸菌和酵母菌的復(fù)配。乳酸菌總數(shù)的檢測(cè)，已有國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)可以遵循，如GB 4789.35-2010乳酸菌總數(shù)檢驗(yàn)，但是市場(chǎng)上為適應(yīng)多種條件和多種宿主，將多種不同的微生態(tài)制劑，如乳酸菌、酵母菌按照一定比例復(fù)合配制得到的復(fù)合微生態(tài)產(chǎn)品。而在檢測(cè)復(fù)合微生態(tài)制劑中乳酸菌總數(shù)的時(shí)候，按照國(guó)標(biāo)檢測(cè)方法進(jìn)行的話，乳酸菌的總數(shù)檢測(cè)就會(huì)受其他微生態(tài)產(chǎn)品的嚴(yán)重干擾，如酵母類，其原因有：一、酵母類的微生物雖然培養(yǎng)時(shí)間稍長(zhǎng)，但是在采用MRS培養(yǎng)基進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，其前期的酵母類菌落形態(tài)，如釀酒酵母和乳酸菌的菌落形態(tài)非常相近(酵母生長(zhǎng)在固體培養(yǎng)基上時(shí)，菌落表面一般光滑、濕潤(rùn)、有粘稠性，大多數(shù)是乳白色；乳酸菌生長(zhǎng)在固體培養(yǎng)基上時(shí)，菌落邊緣整齊、圓形，表面光澤，乳白色)，會(huì)造成乳酸菌的計(jì)數(shù)不準(zhǔn)確。二、復(fù)合制劑中酵母類的添加量與乳酸菌類的較為接近時(shí)，后期雖然依然可以從菌落形態(tài)上分辨，但是培養(yǎng)時(shí)間長(zhǎng)；而在酵母添加量遠(yuǎn)大于乳酸菌時(shí)，酵母會(huì)長(zhǎng)滿平板，造成乳酸菌無法檢出。所以復(fù)合微生態(tài)制劑中乳酸菌總數(shù)的準(zhǔn)確和快速檢測(cè)是生產(chǎn)廠家以及飼料廠家的一大難點(diǎn)技術(shù)。

目前雖然可用抗生素抑制酵母類的生長(zhǎng)，如納他霉素等；但是，在培養(yǎng)基中添加抗生素，需先行用無菌濾膜過濾備用，然后等溶解過后的固體培養(yǎng)基冷卻至適宜溫度后加入，這樣使操作繁瑣，且增加了染菌幾率。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種檢測(cè)培養(yǎng)基，其能夠有效抑制乳酸菌中酵母的生長(zhǎng)。

本發(fā)明的另一目的在于提供一種復(fù)合微生態(tài)制劑中乳酸菌總數(shù)的檢測(cè)方法，其能省掉添加抗生素的繁瑣操作，在檢測(cè)過程中，就可以有效抑制乳酸菌中酵母的生長(zhǎng)，不需要額外添加抗生素。

本發(fā)明的實(shí)施例是這樣實(shí)現(xiàn)的：

一種檢測(cè)培養(yǎng)基，按重量份數(shù)計(jì)，其組分按重量份數(shù)計(jì)包括：牛肉浸粉5-10份、酵母浸粉5-8份、麥芽糖5-20份、硫酸鎂0.1-0.3份、乙酸鈉3-5份、檸檬酸銨10-20份、硫酸錳0.05-0.1份、山梨酸鉀0.2-0.8份、谷氨酸鈉1-5份、瓊脂粉15-20份以及蒸餾水1000份；檢測(cè)培養(yǎng)基的pH值為5.5-7.0。

一種復(fù)合微生態(tài)制劑中乳酸菌總數(shù)的檢測(cè)方法，其包括以上述檢測(cè)培養(yǎng)基對(duì)復(fù)合微生態(tài)制劑的待檢測(cè)樣品進(jìn)行培養(yǎng)，并對(duì)長(zhǎng)出的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)和觀察。

本發(fā)明實(shí)施例的有益效果例如包括：

本發(fā)明通過對(duì)檢測(cè)培養(yǎng)基進(jìn)行改良，起到抑制復(fù)合微生態(tài)制劑中酵母類微生物，而不影響乳酸菌的生長(zhǎng)的作用，進(jìn)而達(dá)到準(zhǔn)確檢測(cè)乳酸菌總數(shù)的目的。該檢測(cè)培養(yǎng)基的組成簡(jiǎn)單、制備操作方便，檢測(cè)方法簡(jiǎn)單，有利于快速檢測(cè)結(jié)果。乳酸菌生長(zhǎng)在培養(yǎng)基表面，便于菌落的形態(tài)觀察和分析。

具體實(shí)施方式