[發明專利]檢測培養基以及復合微生態制劑中乳酸菌總數的檢測方法

在審

• 申請號: 201711452460.8
• 申請日: 2017-12-26
• 公開（公告）號: CN108085362A
• 公開（公告）日: 2018-05-29
• 發明（設計）人: 吳微;張茜茜;詹志春;周櫻;諶頡
• 申請（專利權）人: 武漢新華揚生物股份有限公司;湖北華揚科技發展有限公司
• 主分類號: C12Q1/06
• 分類號: C12Q1/06;C12Q1/04
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371
• 代理人: 王闖

1.一種檢測培養基，其特征在于，其組分按重量份數計包括：牛肉浸粉5-10份、酵母浸粉5-8份、麥芽糖5-20份、硫酸鎂0.1-0.3份、乙酸鈉3-5份、檸檬酸銨10-20份、硫酸錳0.05-0.1份、山梨酸鉀0.2-0.8份、谷氨酸鈉1-5份、瓊脂粉15-20份以及蒸餾水1000份；所述檢測培養基的pH值為5.5-7.0。

2.根據權利要求1所述的檢測培養基，其特征在于，所述檢測培養基的所述組分按重量份數計包括：牛肉浸粉8-10份、酵母浸粉5-6份、麥芽糖10-20份、硫酸鎂0.1-0.2份、乙酸鈉3-4份、檸檬酸銨10-15份、硫酸錳0.05-0.07份、山梨酸鉀0.2-0.5份、谷氨酸鈉2-5份、瓊脂粉15-18份以及蒸餾水1000份；所述檢測培養基的pH值為5.5-6.0。

3.根據權利要求1所述的檢測培養基，其特征在于，所述檢測培養基中還包括苯甲酸、苯甲酸鈉、苯甲酸鉀、對羥基苯甲酸、對羥基苯甲酸乙酯以及對羥基苯甲酸丁酯中的一種或多種；優選地，所述檢測培養基中還包括對羥基苯甲酸乙酯1-5份以及對羥基苯甲酸丁酯1-5份。

4.根據權利要求1所述的檢測培養基，其特征在于，所述檢測培養基的滅菌溫度為115℃-121℃滅菌20-30分鐘。

5.根據權利要求1-4任一項所述的檢測培養基，其特征在于，所述山梨酸鉀是由山梨酸、碳酸鉀以及葉酸溶于水中，于70-80℃下反應30-40min得到山梨酸鉀溶液，將所述山梨酸鉀溶液烘干，得到所述山梨酸鉀；其中，所述山梨酸、所述碳酸鉀以及所述葉酸的質量比為：1:0.3-0.4:0.03-0.06。

6.根據權利要求1-4任一項所述的檢測培養基，其特征在于，所述谷氨酸鈉的制備方法包括：將淀粉、尿素、磷酸鉀、硫酸鐵和硫胺混合后殺菌，接種嗜氨小桿菌，攪拌培養，在攪拌過程中送入無菌空氣，經過濾除去菌體后得到谷氨酸結晶體，利用碳酸鈉中和所述谷氨酸結晶體，得到谷氨酸鈉。

7.一種復合微生態制劑中乳酸菌總數的檢測方法，其特征在于，其包括以權利要求1-6任一項所述的檢測培養基對復合微生態制劑的待檢測樣品進行培養，并對長出的菌落進行計數和觀察。

8.根據權利要求7所述的復合微生態制劑中乳酸菌總數的檢測方法，其特征在于，所述復合微生態制劑中至少包括酵母菌和乳酸菌。

9.根據權利要求7所述的復合微生態制劑中乳酸菌總數的檢測方法，其特征在于，

取樣品，用生理鹽水稀釋至預設濃度得菌懸液；

將滅菌后的所述檢測培養基倒入空白培養皿中，冷卻制成培養基平板，將所述菌懸液涂布于所述培養基平板上；

將涂布有所述菌懸液的所述培養基平板培養24-72h，觀察長出的單菌落，選擇含有30-300個菌落的培養基平板進行結果計算；

乳酸菌單菌落形態觀察：在本發明培養基上，乳酸菌為乳白色、圓形、邊緣整齊、凸起、表面有光澤，菌落直徑0.5-2mm。

10.根據權利要求7所述的復合微生態制劑中乳酸菌總數的檢測方法，其特征在于，稀釋所述樣品包括：先將所述樣品置于生理鹽水中制成濃度為0.01的中間菌懸液，然后再取所述中間菌懸液置于生理鹽水中配制形成濃度為0.001的所述菌懸液。