[發明專利]一種烏參多糖的制備方法

在審

• 申請號: 201711447375.2
• 申請日: 2017-12-27
• 公開（公告）號: CN108047347A
• 公開（公告）日: 2018-05-18
• 發明（設計）人: 陳蔭;楊紅麗
• 申請（專利權）人: 浙江海洋大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 杭州九洲專利事務所有限公司 33101
• 代理人: 翁霽明

一種烏參多糖的制備方法，包括如下步驟：a）剝掉外皮的東海烏參，剪碎后經2倍體積丙酮反復脫脂至少2次，將脫脂完全后的烏參置于干燥箱中烘干；b）取干燥后的魚鰾經粉碎機粉碎過100目篩后置于燒杯中，并加入20倍體積的1M KOH溶液，堿解1.5?2.5h。

技術領域

本發明涉及的是一種烏參多糖的制備方法，尤其是一種東海烏參來源新穎糖胺聚糖的制備方法，屬于海洋生物技術領域。

背景技術

隨著研究的不斷深入，新的多糖資源和生物功能被不斷發現。從不同海洋生物中獲得結構特異和活性豐富的海洋特征多糖，開發海洋糖類資源仍然是海洋糖類研究的重要方向。

對于海洋動物來源的多糖主要集中在蝦蟹來源的殼聚糖和海參中的糖胺聚糖。海參糖胺聚糖是海參體壁的一類重要成分，其含量可占干參總有機物的6%以上，是由D-N-乙酰氨基半乳糖、D-葡萄糖醛酸和L-巖藻糖組成的分支雜多糖，是海參的主要活性成分，具有抗凝血，溶栓，神經保護和調節血脂等活性，已經開發成海參多糖口服液等產品，大大提高了海參的產值。對于海參多糖的研究主要集中于刺參，刺參市場認可度高，所以提取制備多糖口服液成本相對較高，而我國有20多種可食用海參，尋找刺參的替代種類用于制備活性豐富的海參多糖，不僅有助于海洋多糖類藥物的開發利用，還能實現低值海參種類的高值化利用，促進捕撈和養殖業的發展。

東海烏參(學名:白肛海地瓜Acaudina leucoprocta ), 屬于芋參目(Molpiadida)尻參科(Caudinidae), 是我國20多種可供食用的海參之一, 盛產于我國浙江沿海海域, 資源豐富,其營養成份和口感與刺參相差不大,蛋白質含量高,氨基酸組成合理,脂肪酸含量低,是一種優質廉價的海參資源, 因而常作為刺參的替代品。東海烏參生長于海底游泥上,體表分泌的粘液與含重金屬沉積物的海底游泥牢固地結合, 形成了致密堅硬的體表污坂層, 常規的清洗方法難以去除,而且東海烏參腥味重,難去除,傳統的脫腥方法嚴重影響東海烏參的整體形態,并且腥味去除的效果不好;致密的體表污據影響其蛋白質利用率, 影響東海烏參的進一步發利用。

以往由于缺乏精加工等關鍵技術，大多數情況下，東海烏參捕撈后被作為廢棄物丟棄。舟山水產品加工企業通過生物酶解技術脫去海參表皮，快速低溫保藏了海參的營養成分，實現了海參加工的產業化，而對其海參多糖的研究將進一步促進東海烏參變廢為寶，提高產值，實現高值化利用。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術存在的不足，而提供一種制備方法簡單、可靠，烏參來源廣，能夠豐富海洋多糖資源，能推進豐富海洋動物資源為基礎的海洋多糖生物醫藥發展的烏參多糖的制備方法。

本發明的目的是通過如下技術方案來完成的，一種烏參多糖的制備方法，所述的制備方法包括如下步驟：

a）剝掉外皮的東海烏參，剪碎后經2倍體積丙酮反復脫脂至少2次，將脫脂完全后的烏參置于干燥箱中40-50℃烘干；

b）取干燥后的魚鰾經粉碎機粉碎過100目篩后置于燒杯中，并加入20倍體積的1M KOH溶液，堿解1.5-2.5h；

c）然后，先用冰醋酸調節pH至4-5后加入4%胃蛋白酶，35-40℃下提取1.5-2.5h后再用0.1M NaOH調節pH至7.8-8.2后加入4%胰蛋白酶，35-40℃下提取1.5-2.5h，最后用冰醋酸調回至中性，再升溫至75-85℃提取，0.5-1.5h將酶滅活；

d）將得到的水提物于7500-8500 r/min高速離心機離心15-25min后留上清液；殘渣按上述提取方法再重復提取一次；

e）合并兩次所得上清液，經45-55℃旋轉蒸發儀濃縮至原體積的1/10，加入4倍體積無水乙醇醇沉過夜,然后醇沉物再經過Sevege法反復脫除蛋白，經透析袋流水透析68-75h后，冷凍干燥即得淡黃色粉末狀烏參粗多糖。

作為優選：所述的制備方法包括如下步驟：