[發明專利]一種高效表達重組雞α干擾素的工程菌

在審

• 申請號: 201711444595.X
• 申請日: 2017-12-27
• 公開（公告）號: CN108220214A
• 公開（公告）日: 2018-06-29
• 發明（設計）人: 焦培榮;廖明;吳斯宇;黃鑒妮;馮賽祥;何婉婷
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: C12N1/21
• 分類號: C12N1/21;C12N15/70;C12N15/21;C07K14/56
• 代理公司: 石家莊德皓專利代理事務所(普通合伙) 13129
• 代理人: 齊軍彩;楊瑞龍

1.一種高效表達重組雞α干擾素的工程菌，其特征在于，通過以下步驟獲得：

S1、根據大腸桿菌密碼子的偏好性對Genebank中發表的雞α干擾素基因序列進行密碼子優化，人工合成該雞α干擾素基因；

S2、根據密碼子優化后的雞α干擾素基因，設計一對特異性的引物：

ChIFN-α-F：AATGCGGAATTCATGTGCAACCATCTGCGCCC

ChIFN-α-R：AATGCGAAGCTTCTAGGTGCGGGTGTTGCCGG

S3、以人工合成的雞α干擾素基因為模板，以含EcoRI酶切位點的ChIFN-α-F和含HindIII酶切位點ChIFN-α-R為引物，將雞α干擾素基因PCR擴增；PCR產物經EcoRI、HindIII雙酶切克隆到原核表達載體pET-41a，經PCR鑒定正確的重組陽性質粒送測序；

S4、將測序正確的pET-41a-ChIFN-α重組質粒轉化BL21(DE3)感受態細胞，經卡那霉素抗性平板篩選、EcoRI、HindIII 雙酶切鑒定，進一步驗證該重組陽性質粒；

S5、重組雞α干擾素的原核表達及抗病毒活性測定。

2.一種雞α干擾素優化基因，其序列如SEQ ID NO：1所示。

3.一種雞α干擾素的氨基酸，其序列如SEQ ID NO：2所示。