[發(fā)明專利]一種抑制胃癌細胞MGC-803的靶點及其應用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711442769.9
• 申請日: 2017-12-27
• 公開（公告）號: CN108103194B
• 公開（公告）日: 2021-05-18
• 發(fā)明（設計）人: 謝勇;趙京鳳;趙曉宏;成鐘;王楠;王洋;蔡大勇
• 申請（專利權(quán)）人: 中國醫(yī)學科學院藥用植物研究所
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;A61K45/00;A61P35/00
• 代理公司: 太原晉科知識產(chǎn)權(quán)代理事務所(特殊普通合伙) 14110
• 代理人: 鄭晉周

1.一種抑制ARL8B基因表達的siRNA分子在制備促進胃癌細胞MGC-803自噬的藥物中的應用，其特征在于：所述siRNA分子正義鏈序列為：5'-CCACCUUCGUCAACGUGAUTT-3'，反義鏈序列為5'-AUCACGUUGACGAAGGUGGTT-3'。

2.如權(quán)利要求1所述的應用，其特征在于：所述siRNA分子可定向干擾MGC-803細胞中ARL8B基因表達，所述定向干擾包括以下步驟：

（1）將MGC-803細胞接種到細胞培養(yǎng)板中，1640完全培養(yǎng)基，37℃，5%的CO₂培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時后備用；

（2）用Opti-MEM 稀釋所述的siRNA分子和Lipofectamine^TM 2000，室溫下靜置5分鐘后，將兩者混合，混勻并在室溫下孵育20分鐘；

（3）將步驟（1）中培養(yǎng)細胞的1640完全培養(yǎng)基去掉，換成1640基本培養(yǎng)基，在37℃，5%的CO₂培養(yǎng)箱孵育20分鐘；

（4）將步驟（2）所得的混合物加入步驟（3）的培養(yǎng)細胞中，在37℃，5%的CO₂培養(yǎng)箱孵育5小時后，去掉培養(yǎng)基，換成1640完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)24小時-48小時；

（5）將步驟(4)所得細胞提蛋白，做Western Blot檢測。