[發明專利]一種特異性吸附牛血紅蛋白的分子印跡磁性納米顆粒

有效

• 申請號: 201711439107.6
• 申請日: 2017-12-27
• 公開（公告）號: CN108164662B
• 公開（公告）日: 2019-10-29
• 發明（設計）人: 蘇宇杰;邱碧霞;楊嚴俊
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C08F292/00
• 分類號: C08F292/00;C08F220/06;C08F222/02;C08F222/38;C08J9/26;B01J20/26;B01J20/28
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 張勇

本發明公開了一種特異性吸附牛血紅蛋白的分子印跡磁性納米顆粒，屬于生化分離技術領域。本發明制備了一種具有特異性吸附目標蛋白能力的分子印跡功能化磁性納米顆粒。該顆粒對于牛血紅蛋白的吸附分離條件溫和、反應簡單快速，可實現在蛋白質混合溶液中對目標蛋白——牛血紅蛋白的特異性吸附，為蛋白質的分離與純化研究奠定良好的基礎。

技術領域

本發明涉及一種特異性吸附牛血紅蛋白的分子印跡磁性納米顆粒，屬于生化分離技術領域。

背景技術

分子印跡是基質與目標分子在分子大小、形態構象、三維結構、活性基團等方面存在互補配對的現象。分子印跡技術(Molecularly ImprintedTechnology,MIT)以目標分子作為模板，將具有與目標分子互補結構的功能化聚合物單體與模板分子結合，并加入交聯劑進行聚合反應，反應完成后將模板分子洗脫下來，形成一種具有固定空穴大小和形狀以及有確定排列功能團的分子印跡聚合物。分子印跡技術最廣泛的應用是在小分子物質的識別和分離中，如固相萃取、抗生素檢測、毒素檢測以及藥物釋放等領域。

分子印跡聚合物有多種制備方法。目前已研究過的有溶液本體聚合法、懸浮聚合法、乳液聚合法、種子膨脹聚合法、沉淀聚合法以及表面印跡技術。目前，表面分子印跡技術由于傳質阻力小、印跡效率高、吸附速率快等特點而越來越受到關注。表面分子印跡技術是指在固體載體表面印跡上分子聚合物的方法，它有兩種基本形式，一種是在載體內部的孔隙表面，如介孔材料；一種是在球形小顆粒表面，如二氧化硅顆粒、石墨烯顆粒、Fe₃O₄磁性納米顆粒等。這些表面分子印跡材料都具有高印跡效率的特點，但是，大部分卻由于具有親水基團、沉降過程繁雜而分離效率不高。而結合了磁感應性與表面分子印跡聚合物的分子印跡Fe₃O₄磁性納米顆粒不僅實現了高選擇性、高吸附性，還實現了基質與溶液體系的有效快速分離，從而有利于目標分子的獲取。

雖然蛋白質分子量大、結構復雜、構象易變，但是，將分子印跡技術應用于蛋白質的識別、吸附、分離和富集等方面的研究近年來越來越受到關注。

發明內容

本發明制備了一種具有特異性吸附目標蛋白能力的分子印跡功能化磁性納米顆粒。該顆粒對于牛血紅蛋白的吸附分離條件溫和、反應簡單快速，可實現在蛋白質混合溶液中對目標蛋白——牛血紅蛋白的特異性吸附，為蛋白質的分離與純化研究奠定良好的基礎。

所述具有特異性吸附目標蛋白能力的分子印跡功能化磁性納米顆粒的制備方法包括一步法制備硅烷化丙烯酸功能化Fe₃O₄磁性納米顆粒(Fe₃O₄@SiO₂-AA)、制備分子印跡磁顆粒(MMIPs)。

所述一步法制備硅烷化丙烯酸功能化Fe₃O₄@SiO₂-AA顆粒，包括以下步驟：

(1)制備Fe₃O₄磁性納米顆粒

具體地，稱取FeSO₄·7H₂O與FeCl₃·6H₂O，加入去離子水和無水乙醇(二者體積比為5：1)，通入氮氣，攪拌反應一段時間后，加入氨水調整pH為10-11，溶液瞬間由棕紅色變為黑色，繼續熟化反應，得到Fe₃O₄磁性納米顆粒沉淀物；

(2)Fe₃O₄磁性納米顆粒的硅烷化丙烯酸功能化修飾