[發明專利]一種特異性吸附牛血紅蛋白的分子印跡磁性納米顆粒

有效

• 申請號: 201711439107.6
• 申請日: 2017-12-27
• 公開（公告）號: CN108164662B
• 公開（公告）日: 2019-10-29
• 發明（設計）人: 蘇宇杰;邱碧霞;楊嚴俊
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C08F292/00
• 分類號: C08F292/00;C08F220/06;C08F222/02;C08F222/38;C08J9/26;B01J20/26;B01J20/28
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 張勇

1.一種制備具有特異性吸附牛血紅蛋白能力的分子印跡功能化磁性納米顆粒的方法，其特征在于，包括一步法制備硅烷化丙烯酸功能化Fe₃O₄磁性納米顆粒Fe₃O₄@SiO₂-AA、制備分子印跡磁顆粒；

所述一步法制備硅烷化丙烯酸功能化Fe₃O₄@SiO₂-AA顆粒，包括以下步驟：

(1)制備Fe₃O₄磁性納米顆粒：稱取FeSO₄·7H₂O與FeCl₃·6H₂O，加入去離子水和無水乙醇，通入氮氣，攪拌反應一段時間后，加入氨水調整pH為10-11，溶液瞬間由棕紅色變為黑色，繼續熟化反應，得到Fe₃O₄磁性納米顆粒沉淀物；

(2)Fe₃O₄磁性納米顆粒的硅烷化丙烯酸功能化修飾：將熟化后的反應體系溫度降為28～30℃，逐滴加入TEOS進行硅烷化修飾，攪拌反應1-3h；將硅烷化修飾后的反應溶液置于外加磁場中，除去上清反應液，將磁顆粒用去離子水清洗數遍后，加入乙醇和丙烯酸，通入氮氣，并水浴攪拌反應2-5h；反應完成后，將功能化修飾后的磁性納米顆粒置于外加磁場進行分離，清洗后于真空中濃縮干燥；

(3)向經過硅烷化丙烯酸功能化修飾得到的Fe₃O₄@SiO₂-AA顆粒中，依次加入一定量的功能單體甲基丙烯酸和衣康酸，交聯劑亞甲基雙丙烯酰胺和PBS緩沖溶液，使得相對于PBS緩沖液，以mL/mL計，Fe₃O₄@SiO₂-AA顆粒的濃度為0.25％-0.35％，甲基丙烯酸的濃度為0.3％-0.4％，衣康酸的濃度為0.025％-0.125％，亞甲基雙丙烯酰胺的濃度為0.06％-0.12％，超聲振蕩混合后，加入濃度為0.025％-0.075％的牛血紅蛋白混合均勻；

(4)將步驟(3)得到的反應體系振蕩混勻后，通入氮氣除去O₂，加入APS和TEMED作為引發劑于25℃水浴振蕩反應10-14h，反應結束后，傾去反應液，洗脫磁顆粒上的印跡模板，可得到分子印跡磁顆粒。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，整個反應過程中需維持氮氣氛圍，以免Fe₃O₄被氧化。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，將熟化后的反應體系溫度降為30℃，逐滴加入5％的TEOS乙醇溶液進行硅烷化修飾，攪拌反應1-3h；將硅烷化修飾后的反應溶液置于外加磁場中，除去上清反應液，將磁顆粒用去離子水清洗數遍后，以g/mL計，加入一定量乙醇使磁顆粒的濃度為0.3％-0.4％，加入一定量丙烯酸使其濃度為2.5％-3.5％，通入氮氣，置于30℃水浴中，保持機械攪拌900r/min，反應2-5h；反應完成后，將功能化修飾后的磁性納米顆粒置于外加磁場進行分離，分別用去離子水和乙醇清洗三遍，于真空中濃縮干燥。

4.根據權利要求1～3任一所述方法制備得到的具有特異性吸附牛血紅蛋白能力的分子印跡功能化磁性納米顆粒。

5.權利要求4所述的具有特異性吸附牛血紅蛋白能力的分子印跡功能化磁性納米顆粒在特異性識別、吸附、分離牛血紅蛋白中的應用。