[發明專利]具有表面蛋白簡化糖基化的病毒顆粒的生產方法

在審

• 申請號: 201711437066.7
• 申請日: 2011-11-04
• 公開（公告）號: CN108165534A
• 公開（公告）日: 2018-06-15
• 發明（設計）人: 翁啟惠;馬徹;曾勇杰
• 申請（專利權）人: 中央研究院
• 主分類號: C12N7/00
• 分類號: C12N7/00;A61K39/145;A61K39/12;A61P31/16
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 崔佳佳;劉妍珺

提供了生產在結構或表面蛋白上具有簡化糖基化的病毒顆粒的方法。在用作疫苗生產靶標時，此類位點的保守性質產生出對病毒突變敏感性降低的疫苗。公開了糖基化抑制劑用于生產具有簡化糖基化譜的病毒的用途。提供了流感病毒和用于生產單糖基化流感病毒顆粒的方法的示例性公開。提供了A型流感病毒NIBRG?14(H5N1)的單糖基化形式的生產方法。

發明人：

齊暉·王，馬澈和曾永杰

相關申請的交叉引用

本申請要求2010年11月4日提交的、標題為“單糖基化流感病毒血凝素的生產方法”的美國臨時專利申請序列號No.61/410,257的優先權，其全部內容援引加入本申請。

技術領域

本發明涉及病毒且具體涉及具有簡化聚糖(simplified glycans)的病毒顆粒的生產。具體地，本發明涉及具有簡化糖基化的流感病毒顆粒的生產。具體地，本發明涉及單糖基化流感病毒顆粒的生產方法。

背景技術

本發明公開了單糖基化(mono-glycosylated)流感病毒的示例性制備。認為相同方法可用于制備具有簡化聚糖結構的其他病毒，包括逆轉錄病毒(如人免疫缺陷病毒(HIV))和黃病毒(如登革病毒、西尼羅病毒、丙肝病毒(HCV)等)。

流感是由正粘病毒科的RNA病毒導致的。這些病毒有3種類型且它們導致3種不同類型的流感：A、B和C型流感。A型流感病毒感染哺乳動物(人、豬、雪貂、馬)和禽類。由于此類病毒已導致世界范圍的疾病大流行，其對人類非常重要。B型流感病毒(也簡稱做流感B)僅感染人類。其偶爾導致流感的局部爆發。C型流感病毒也僅感染人類。它們感染大多數年輕人且很少導致嚴重的疾病。

A型流感病毒感染種類繁多的哺乳動物，包括人、馬、豬、雪貂和禽類。該主要的人類病原體與時疫和疾病大流行相關。有至少15種已知的血凝素(H)血清型和9種已知的神經氨酸酶(N)血清型。認為豬和禽類是特別重要的儲存宿主，產生了在遺傳和抗原性方面不同的病毒庫，其通過人與動物之間的親密接觸而反向傳播至人群。B型流感病毒僅感染哺乳動物且導致疾病，但通常不如A型嚴重。與A型流感病毒不同，B型流感病毒沒有可區分的血清型。C型流感病毒也僅感染哺乳動物，但很少導致疾病。它們在遺傳和形態學上不同于A型和B型。

流感病毒中存在4種抗原：血凝素(HA)、神經氨酸酶(NA)、核殼體(NA)、基質(M)和核殼體蛋白(NP)。NP是以A、B和C三種形式存在的類型特異性抗原，其提供了人流感病毒的分類基礎。基質蛋白(M蛋白)環繞核殼體且構成35-45％的顆粒質量。在表面上觀察到呈棒狀突起的兩種表面糖蛋白。血凝素(HA)首先合成為包含三條相同蛋白鏈的三聚前體(HA0)，其中每條蛋白鏈經蛋白水解加工成通過單個二硫鍵共價結合在一起的兩個亞基HA1和HA2。HA介導病毒與細胞受體的附著。神經氨酸酶(NA)分子以較少的量存在于外殼中。流通的人類株因其常年累積突變并導致周期性時疫的趨勢而眾人皆知。