[發明專利]一種提取殘留DNA的方法在審
| 申請號： | 201711421227.3 | 申請日： | 2017-12-25 |
| 公開（公告）號： | CN109957561A | 公開（公告）日： | 2019-07-02 |
| 發明（設計）人： | 翟玉貴;朱秀娟 | 申請（專利權）人： | 無錫藥明康德生物技術股份有限公司 |
| 主分類號： | C12N15/10 | 分類號： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京奉思知識產權代理有限公司 11464 | 代理人： | 吳立;鄒軼鮫 |
| 地址： | 214092 江蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 孵育 殘留 月桂酰肌氨酸鈉 準確度 核酸分子 混合溶液 室溫環境 碘化鈉 裂解液 上清液 鹽溶液 異丙醇 生物制品 糖原 沉淀 釋放 | ||
1.一種提取核酸的方法，其特征在于，包括：
步驟1、向待提取樣品中加入裂解液以釋放核酸分子，混合并孵育；
步驟2、向樣品中加入月桂酰肌氨酸鈉鹽溶液；
步驟3、向樣品中加入含有碘化鈉、糖原、異丙醇的混合溶液，并在室溫環境下孵育；
步驟4、將樣品離心，除去上清液，收集沉淀。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，還包括以下步驟：
溶解提取的核酸，進行PCR檢測，計算加標回收率。
3.如權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述裂解液為包含去垢劑和蛋白酶K的混合液，其中去垢劑包含EDTA溶液和SDS溶液。
4.如權利要求3所述的方法，其特征在于，經步驟1混合后的溶液中EDTA終濃度為10mM以上，SDS的質量百分含量為0.1％至1％。
5.如權利要求1或2所述的方法，其特征在于，經步驟3混合后的溶液中月桂酰肌氨酸鈉鹽的質量百分含量為0.5％以上。
6.如權利要求1或2所述的方法，其特征在于，經步驟3混合后的溶液中碘化鈉的終濃度為大于1.6M。
7.如權利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述待提取樣品是由宿主細胞生產的蛋白質，優選由CHO細胞株生產的蛋白質。
8.如權利要求1或2所述的方法，其特征在于，步驟1中所述孵育使用的溫度為57℃。
9.如權利要求1或2所述的方法，其特征在于，步驟3中所述的室溫為10℃至30℃中任一溫度。
10.一種提取核酸的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括裂解液、月桂酰肌氨酸鈉鹽溶液、含有碘化鈉、糖原、異丙醇的混合溶液。
11.如權利要求10所述的試劑盒，其特征在于，所述裂解液為包含去垢劑和蛋白酶K的混合液，其中去垢劑包含EDTA溶液和SDS溶液。
12.如權利要求11所述的試劑盒，其特征在于，在向樣品加入裂解液后，SDS的質量百分含量為0.1％至1％。
13.如權利要求10所述的試劑盒，其特征在于，在加入月桂酰肌氨酸鈉鹽混后的溶液和含有碘化鈉、糖原、異丙醇的混合溶液混合后的溶液后，所述月桂酰肌氨酸鈉鹽的質量百分含量為0.5％以上。
14.如權利要求10所述的試劑盒，其特征在于，經加入含有碘化鈉、糖原、異丙醇的混合溶液混合后的溶液中，碘化鈉的終濃度為1.62M。
15.如權利要求10至14任一項所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括樣本提取裝置或使用如權利要求1只9任一項所述方法的說明書。
16.如權利要求15所述的試劑盒，其特征在于，所述樣本提取裝置為96孔板。
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