[發明專利]樟樹葉煙用香料的制備方法

在審

• 申請號: 201711409601.8
• 申請日: 2017-12-23
• 公開（公告）號: CN107955710A
• 公開（公告）日: 2018-04-24
• 發明（設計）人: 彭天輝
• 申請（專利權）人: 尋烏縣綠之源生物科技有限公司
• 主分類號: C11B9/02
• 分類號: C11B9/02;C12N1/20;C12N1/16;C12N1/02;A24B3/12;C12R1/07
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技術領域

本發明涉及一種煙用香料的制備方法，具體地指一種樟樹葉煙用香料的制備方法。

背景技術

加香加料是卷煙工藝中的關鍵環節，是完善產品風格的決定性因素和提高卷煙香氣質量的有效手段之一。目前煙用香料按香料生產方法的不同主要分為2種，即采用各種分離手段直接從煙草或其它植物中提取的天然香料和采用化學反應合成的香料。

樟樹葉中含量豐富的樟葉黃酮和各種維生素，可以有效地防止煙草中尼古丁、苯并芘、放射性元素及大量的自由基等對人體的危害。樟葉中的多酚類物質(樟多酚)可與香煙中尼古丁化合形成無毒復合物，對煙堿還有良好的過濾作用。在煙絲中加入不同濃度的樟葉提取物，能降低卷煙焦油含量和焦油的致突變性。樟多酚對氣相煙引起鼠肺細胞膜損傷具有抑制作用，可抑制氣相煙自由基引起的膜脂類分子的過氧化作用，對維護細胞膜的流動性有良好效果，可以有效地清除由GPCS(香煙氣霧)處理的大鼠肝線粒體產生的脂質自由基，能抑制煙氣中有害物質的生物活性和它對生物體基因的惡變，對“亞硝胺”、“黃曲霉毒素B1”等其它強致癌物的毒性，也有抑制作用。

由于樟樹葉具有上述的多項優點，現有技術已有將樟樹葉精油用于煙草工業中報道，但是并未詳述其工藝過程。

發明內容

(1)要解決的技術問題

本發明的目的在于填補現有技術的空白，提供一種樟樹葉煙用香料的制備方法。

(2)技術方案

為實現上述目的，本發明所提供的樟樹葉煙用香料的制備方法，所述方法包括以下步驟：

(1)原料準備：

①選取樟樹葉作為原料、滅菌得到無菌樟樹葉備用；滅菌條件可選用在115℃下滅菌15～20min，為本領域常用技術手段；滅菌前可將樟樹葉粉碎成樟樹葉粉，使微生物分解樟樹葉時更快速。

②煙葉復合培養基的制備：將煙葉和水按1∶5的比例混合后加熱至100℃，并保持1～2小時，過濾得到煙水，將煙水和微生物固體培養基按3∶7～10的比例混合，制成煙葉復合培養基；制作煙葉復合培養基在于為其后的微生物培養提供適宜的生長環境，促進能分解煙草中有機物，產生香氣的微生物有更大幾率成為優勢菌種。

(2)產香微生物的篩選：

①取煙葉5～10g，加入到無菌蒸餾水中，從中取100～1000μl的液體，滴加到由步驟(1)得到的煙葉復合培養基上，以平板劃線分離或稀釋涂平板法，在有氧或厭氧條件下培養，長出菌落后，將煙葉復合培養基放到體視鏡下篩查，挑取10～50個酵母菌和/或芽孢桿菌的單菌落；發明人在大量的試驗中得出酵母菌作為能產香微生物的效果更優秀，其次為芽孢桿菌，其他的菌體不適宜作為產香微生物的菌種培養。

②將挑出的單菌落在煙葉復合培養基中分別進行小量擴增培養，將小量擴增培養得到的菌液與無菌樟樹葉混合，進行小試量的固體堆積發酵，然后對發酵好的樟樹葉進行提取，獲得發酵型樟樹葉提取物；將得到的單菌落做小試培養，并提取其分泌的揮發油為篩選產香微生物做準備。

③將發酵型樟樹葉提取物稀釋后添加至香煙中，并通過卷煙加香評吸篩選所需的產香微生物，然后保存篩得的產香微生物的菌種；需要說明的是，卷煙加香評吸一般選取10～15人進行人工的香味評吸，綜合評價能夠產生增加醬香和柔和細膩煙氣作用的微生物作為產香微生物，為本領域常用技術手段，此處不做贅述。保存篩選出的產香微生物菌種可以將其直接作為以后的發酵菌種，而不必每次進行微生物篩選工作，以簡化工藝程序。

(3)利用步驟(2)中得到的產香微生物與無菌樟樹葉混合，進行固體堆積發酵；

需要說明的是，如果是將保存的產香微生物菌種取出來進行樟樹葉的發酵，則需要先將保存的菌種活化，其過程為：將所述產香微生物的菌種接種到斜面培養基上，置于20～37℃的恒溫培養箱中培養24～48h使其中的菌種活化，再將活化的菌種接種于添加糖源的液體培養基中，于20～37℃恒溫培養24～48h得到的培養液，將所述培養液離心棄除上清液，所得到的沉淀用生理鹽水稀釋震蕩均勻，即得到的活化菌種液；斜面培養基優選為固體PDA培養基。添加糖源的液體培養基優選為PDA液體培養基，更適合酵母菌和芽孢桿菌的生長。

(4)對步驟(3)得到的發酵好的樟樹葉進行提取，得到樟樹葉煙用香料。

上述方法中，步驟(1)中所述的煙葉優選為自然陳化一年至兩年的煙葉，其表面的產香微生物較其他的微生物多，為煙葉表面的優勢菌種，使產香微生物的篩選更容易。

步驟(1)中所述的煙葉可選為白肋煙葉。