[發明專利]一種UPLC-MS-MS快速篩查延胡索與醋延胡索差異性的方法

有效

• 申請號: 201711406481.6
• 申請日: 2017-12-22
• 公開（公告）號: CN107957471B
• 公開（公告）日: 2020-03-17
• 發明（設計）人: 黎曉麗;王長軍;索彩仙;梁慧;李國衛
• 申請（專利權）人: 廣東一方制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/06
• 代理公司: 廣州致信偉盛知識產權代理有限公司 44253
• 代理人: 彭玲

本發明公開了一種UPLC?MS?MS快速篩查延胡索與醋延胡索差異性的方法，包括：（1）收集待區分的延胡索與醋延胡索藥材，制成標準湯劑樣品；（2）將樣品進入UPLC?MS?MS進行分析，得到對應的質譜數據；（3）將原始采集的數據直接導入至Compound Discoverer2.1，進行數據分析；（4）采用動態規劃計算法校正色譜峰漂移，對齊色譜峰，利用最鄰近聚類方法將保留時間較為接近的物質注冊成為一個化合物；（5）利用方差分析計算樣品間差異性的物質，確定差異性。本發明將化合物質譜信息輸出為原始文件，不需轉換成其他格式，可直接導入至Compound Discoverer2.1庫中搜索化合物，該方法能夠實現快速鎖定中藥材樣本中存在的差異性化合物，適用于大批量樣本快速分析測定。

技術領域

本發明屬于中藥成分研究技術領域，具體涉及一種UPLC-MS-MS快速篩查延胡索與醋延胡索差異性的方法。

背景技術

延胡索為罌粟科植物延胡索Corydalis yanhusuo W.T.Wang的干燥塊莖。其性味辛、苦，溫，歸肝、脾經，具有活血、行氣、止痛之功，用于胸脅、脘腹疼痛，胸痹心痛，經閉痛經，產后瘀阻，跌仆腫痛。又名元胡、玄胡，與白術、白芍、浙貝母、杭白菊、玄參、筧麥冬、溫郁金并稱“浙八味”，為大眾常用中藥。延胡索的藥用最早記載于陳藏器《本草拾遺》(公元739年)與李珣《海藥本草》(約公元10世紀)。歷代處方用名有延胡索、玄胡索、玄胡、元胡、延胡等，目前《中華人民共和國藥典》用“延胡索”作為藥名。

醋延胡索是延胡索的醋制品，醋制后可以提高延胡索的有效利用率，可以增加治療效果。由于經過炮制，會存在活性成分的差異。因此，對不同炮制方法的同種藥材進行篩選，對于提升中藥品質具有重要的實際意義。

目前，對中藥材的鑒別方法主要有HPLC、IR、NIR、TLC等，這些方法中存在大量的假陽性和假陰性問題，導致利用這些方法進行分析時，可能漏掉重要的物質信息，進而導致所篩選出的差異性物質無法有效表征組別差異，對確定不同炮制方法的同種中藥材鑒別帶來困難。

發明內容

為解決上述問題，本發明的目的在于提供一種快速、準確度高的UPLC-MS-MS快速篩查延胡索與醋延胡索差異性的方法。

本發明是通過以下技術方案實現：

一種UPLC-MS-MS快速篩查延胡索與醋延胡索差異性的方法，包括以下步驟：

(1)收集待區分的延胡索與醋延胡索藥材，將相同炮制方法的不同批次延胡索和醋延胡索藥材各分為一組，將每組延胡索與醋延胡索藥材制成相應的延胡索標準湯劑樣品和醋延胡索標準湯劑樣品，粉碎，過60目篩，于-20℃下避光保存；

(2)取步驟(1)的延胡索和醋延胡索標準湯劑樣品各0.2g，精密稱定，分別置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇25ml，稱定重量，超聲處理20-40分鐘，放冷，再稱定重量，用稀乙醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，得到供試品溶液，隨后進入UPLC-MS-MS系統進行分析，得到每個延胡索標和醋延胡索標準湯劑樣品對應的質譜數據；

(3)將步驟(2)采集的數據直接導入至Compound Discoverer2.1，然后進行數據分析，針對每個樣品進行色譜峰提取和質譜信息表征；

(4)選擇物質色譜峰數量最多的樣品作為參照樣品，采用動態規劃計算法校正樣品間的色譜峰漂移，對齊屬于同一物質的色譜峰，然后利用最鄰近聚類方法將保留時間較為接近的物質注冊成為一個化合物，最終建立一個樣品和色譜峰的注冊圖表；經過外標校正后，用于后續的分析；