[發明專利]用于鑒定桃花粉育性性狀的單核苷酸多態性標記位點、引物對、試劑盒及應用

有效

• 申請號: 201711405949.X
• 申請日: 2017-12-22
• 公開（公告）號: CN107858448B
• 公開（公告）日: 2021-01-01
• 發明（設計）人: 曹珂;王力榮;朱更瑞;方偉超;陳昌文;王新衛;孟歌
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院鄭州果樹研究所
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 鄭州華隆知識產權代理事務所(普通合伙) 41144
• 代理人: 經智勇

1.一種SNP分子標記在鑒定或輔助鑒定桃花粉育性性狀中的應用，其特征在于，所述SNP分子標記序列如SEQ ID NO.1所示，其中，Y表示C或T。

2.一種SNP分子標記在桃花粉育性性狀分子標記輔助選擇育種方面的應用，其特征在于，所述SNP分子標記序列如SEQ ID NO.1所示，其中，Y表示C或T。

3.一種試劑盒在輔助選擇育種方面的應用，其特征在于，所述試劑盒包括PCR擴增引物對和單堿基延伸引物，其中，引物對中上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；單堿基延伸引物為如SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示的核苷酸序列。

4.一種利用SNP分子標記鑒定桃花粉育性性狀的方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）PCR擴增：以待測桃的基因組DNA為模板，用PCR擴增引物對進行PCR擴增，獲得PCR擴增產物；

（2）SAP反應：配制SAP反應體系，加入至步驟（1）PCR擴增反應后的反應體系中，除去PCR擴增反應中未反應的dNTP；

（3）單堿基延伸反應：配制單堿基延伸反應體系，加入至步驟（2）SAP反應后的反應體系中；

（4）基因分型：將完成單堿基延伸反應的產物進行樹脂脫鹽處理，點在芯片上，由芯片掃描儀掃描，檢測分析，根據不同產物的分子量大小進行基因分型，預測桃花粉育性性狀；

其中，PCR擴增引物對中上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；單堿基延伸反應體系中的單堿基延伸引物為如SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示的核苷酸序列。