[發明專利]一種檢測細胞源病毒抗原液的分離純化效果的方法

有效

• 申請號: 201711405772.3
• 申請日: 2017-12-22
• 公開（公告）號: CN108048602B
• 公開（公告）日: 2021-11-26
• 發明（設計）人: 陳宏;趙海源;馮玉強;朱長動;李莉;蔣曉梅;張天舒;王玉紅;王博;孫佰強;崔凱;胡海洋;黃琳;張倞;劉金偉;曾曉敏;王傳飛
• 申請（專利權）人: 吉林冠界生物技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/06;C12R1/93
• 代理公司: 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371
• 代理人: 李進

本發明涉及一種檢測細胞源病毒抗原液的分離純化效果的方法，所述方法包括以下步驟：取經過分離純化后的細胞源病毒抗原液，對所述細胞源病毒抗原液進行濁度定量檢測，記為A值；如果A值≤90NTU，則所述細胞源病毒抗原液的分離純化效果合格；若A值＞90NTU，則所述細胞源病毒抗原液的分離純化效果不合格，繼續分離純化操作，并檢測A值，直至A值≤90NTU。本發明所述方法能夠相對而言較為準確地對病毒抗原的分離效果進行評估，滿足疫苗生產需要，具有快速、簡單、實時、性價比高的優點。

技術領域

本發明涉及抗原純化領域，具體而言，涉及一種檢測細胞源病毒抗原液的分離純化效果的方法。

背景技術

疫苗(vaccine)，是指將病原微生物(如細菌、病毒等)及其代謝產物，經過人工減毒、滅活或利用基因工程等方法制成的用于預防傳染病的自動免疫制劑。目前，疫苗已經成為人類主動防御各種傳染病的最重要手段之一。

病毒是專營宿主細胞內寄生型微生物，因此，除少量基因工程疫苗外，現階段制備疫苗制劑用病毒主要通過大規模培養動物或植物細胞并接種病毒，最終收集細胞裂解后釋放至培養基中的病毒的方式生產獲得。

然而，生產結束后，細胞培養基中不但包括可用作疫苗的病毒，還包括細胞破裂釋放病毒時形成的細胞殘骸和胞內大顆粒物質等，如果不純化處理而直接用于制備疫苗，不但免疫效果不佳，而且對動物和人體存在諸多安全風險。因此，有必要對收獲的培養基進行分離純化。而如何快速、有效地檢測培養基的純化效果，對判定純化操作的停止節點、評價純化操作的有效性、以及評估疫苗的質量具有極為重要的意義。

現有對抗原純化效果的檢測方法主要有兩種：

(1)通過凱氏定氮法測定樣品液中總蛋白的含量，從而大致估計樣品中病毒抗原的純化效果；(2)通過肉眼觀察樣品液的澄清度判斷樣品液的離心效果。

而無論是凱氏定氮法還是肉眼觀察法在評估病毒抗原純化效果方面都存在較大的缺陷。首先，凱氏定氮法是一種比較復雜的滴定方法，需要專門的實驗室進行檢測，檢測過程長，不利于在生產現場快速地對抗原純化效果進行判斷，無法實現在生產過程中實時監測，無法有效保證抗原質量；而且凱氏定氮法比較繁瑣，涉及到硫酸、硼酸、鹽酸等危險化學品，容易對人員造成安全威脅。其次，肉眼觀察澄清度的方法，主觀性太強，因人而異，誤差大。

有鑒于此，特提出本發明。

發明內容

本發明的第一目的在于提供一種檢測細胞源病毒抗原液的分離純化效果的方法，所述方法能夠相對而言較為準確地對病毒抗原的分離效果進行評估，滿足疫苗生產需要，具有快速、簡單、實時、性價比高的優點。

為了實現本發明的上述目的，特采用以下技術方案：

一種檢測細胞源病毒抗原液的分離純化效果的方法，所述方法包括以下步驟：

(1)取經過分離純化后的細胞源病毒抗原液，對所述細胞源病毒抗原液進行濁度定量檢測，記為A值；

(2)如果A值≤90NTU，則所述細胞源病毒抗原液的分離純化效果合格；若A值＞90NTU，則所述細胞源病毒抗原液的分離純化效果不合格，繼續分離純化操作，并檢測A值，直至A值≤90NTU。

具體實施方式

一種檢測細胞源病毒抗原液的分離純化效果的方法，所述方法包括以下步驟：

(1)取經過分離純化后的細胞源病毒抗原液，對所述細胞源病毒抗原液進行濁度定量檢測，記為A值；

(2)如果A值≤90NTU，則所述細胞源病毒抗原液的分離純化效果合格；若A值＞90NTU，則所述細胞源病毒抗原液的分離純化效果不合格，繼續分離純化操作，并檢測A值，直至A值≤90NTU。