[發明專利]一種HPLC-ELSD檢測阿維拉霉素預混劑的方法

有效

• 申請號: 201711405446.2
• 申請日: 2017-12-22
• 公開（公告）號: CN108152414B
• 公開（公告）日: 2021-03-02
• 發明（設計）人: 杜精精;馬曉雨;李金鐘;曹建全;杜石磊
• 申請（專利權）人: 河北圣雪大成制藥有限責任公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 北京集智東方知識產權代理有限公司 11578
• 代理人: 張紅;程立民

1.一種HPLC-ELSD檢測阿維拉霉素預混劑的方法，其特征在于：包括以下步驟：

a、制備阿維拉霉素對照品溶液和樣品溶液；

b、標準曲線繪制：將3-5份不同濃度的對照品溶液分別注入HPLC-ELSD進行測定，洗脫方式為梯度洗脫，記錄對照品色譜圖和峰面積；以A組分峰面積的對數值與相應A組分濃度值的對數進行線性回歸；

c、樣品測定與結果計算：將樣品溶液注入HPLC-ELSD進行測定，記錄色譜圖和峰面積，并以b步驟所得線性回歸方程分別計算樣品溶液色譜圖中A、B組分及雜質的含量百分比；

HPLC-ELSD進行測定的色譜條件如下：

色譜柱：C18 5.0μm 4.6*250mm；

柱溫：30-40℃；

進樣量：10-50μL；

流速：0.9-1.1mL/min；

漂移管溫度：115-130℃；

增益系數：1；

氣體流速：2.0-2.8L/min；

運行時間：40-50min；

流動相A：甲醇/乙酸銨溶液=50/50；

流動相B：甲醇/乙酸銨溶液=80/20；

所述阿維拉霉素對照品溶液以乙腈/磷酸氫二銨緩沖液1/1為溶劑，濃度為0.16-1.6mg/mL；

所述阿維拉霉素樣品溶液的制備方法為：取阿維拉霉素加甲醇制成每1mL中含阿維拉霉素0.8-1.3mg的溶液，充分攪拌或超聲40-90min，搖勻，濾紙過濾，吸取濾液5mL置培養皿中，通風櫥中室溫晾干，定量加入乙腈/磷酸氫二銨緩沖液1/1，玻璃棒攪拌使溶解均勻，用微孔濾膜過濾，作為阿維拉霉素樣品溶液；

所述流動相A和流動相B的處理方法為：甲醇和乙酸銨溶液分別用有機系和水系微孔濾膜真空抽濾，然后分別按照50/50和80/20的比例混合均勻，分別作為流動相A和流動相B，然后超聲脫氣15-30min；

所述梯度洗脫程序為：

時間min	A%	B%
0	70	30
3	70	30
37	35	65
40	70	30
45	70	30

。