[發明專利]植物乳桿菌ZJUF HN9及其應用

有效

• 申請號: 201711404582.X
• 申請日: 2017-12-22
• 公開（公告）號: CN109234181B
• 公開（公告）日: 2020-06-09
• 發明（設計）人: 馮鳳琴;李楊;孔思杰;李陽;趙敏潔;鐘浩
• 申請（專利權）人: 浙江大學;浙江全植生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A61P1/00;A61P31/04;C12R1/25
• 代理公司: 杭州天勤知識產權代理有限公司 33224
• 代理人: 胡紅娟

本發明公開了一種植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)ZJUF HN9及其應用，屬于生物技術領域。植物乳桿菌ZJUF HN9分離自傳統發酵劑酸面團，保藏號為CCTCC NO:M 2017341。本發明提供的植物乳桿菌ZJUF HN9具有耐受高含量膽鹽的能力，有利于其在腸道中存活和繁殖；在胃腸道環境中具有較高生存率、較強的胃腸粘附力，能顯著抑制胃腸道致病菌的繁殖，尤其是鼠傷寒沙門氏菌；此外，該植物乳桿菌具有制備發酵乳的潛力。

技術領域

本發明涉及生物技術領域，具體涉及植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)ZJUF HN9及其 應用。

背景技術

植物乳桿菌是一種常見的乳酸菌，廣泛存在于發酵食品中，如酸面團、泡菜、酸乳、葡 萄酒等，因此其在食品領域應用廣泛。植物乳桿菌與其他益生乳桿菌一樣，具有降低膽固醇、 調節免疫以及維持健康腸道菌群等功能(Seddik et al.,2017)。

益生菌發揮益生作用的前提是順利通過胃的酸性環境以及十二指腸高膽鹽環境，以活菌 的狀態到達小腸和大腸，進而發揮微生態調整的功能(HoodZottola,1988)。而腸道是乳酸菌 最終定值部位，正常生理情況下膽鹽的殘留量約為0.05％-2.0％(Ruiz etal.,2013)。因此在益生 菌篩選工作中，對膽鹽的耐受是益生菌必備的生理特征。

膽鹽是肝細胞分泌的膽汁酸分別與鈉或鉀結合形成的鹽類，如甘氨膽酸鈉、牛磺膽酸鈉 等。膽鹽是膽汁的主要成分之一，在人體中可以促進脂肪的消化和吸收、促進膽固醇代謝、 激活胰酶等。膽鹽是一種陰離子表面活性劑，對細胞膜的磷脂雙分子層有很強的破壞作用， 改變細胞的通透性，從而造成細胞損害或者死亡(Begley et al.,2005)。

現有研究表明，從生境中篩選得到的野生型乳酸菌，絕大多數對膽鹽的耐受性能較差， 從胃腸道或陰道中篩選得到的乳酸菌的耐受能力相對較好。從傳統發酵食品中篩選得到的對 膽鹽耐受能力較好的，有發酵乳桿菌(Bao et al.,2010)、干酪乳桿菌、鼠李糖乳桿菌(Guo et al., 2009)，耐受較高濃度膽鹽的植物乳桿菌仍未見報道。

發明內容

本發明的目的在于提供一種植物乳桿菌(Lactobacillus plantarum)ZJUF HN9，該植物乳桿 菌具有優異的耐受高含量膽鹽的能力，其耐受膽鹽濃度達到0.3％-1.8％，可以確保其在腸道 中的生存、繁殖，為提高益生菌膽鹽耐受性提供研究基礎。

本發明從北方做饅頭用的傳統發酵劑酸面團中分離篩選得到一菌株HN9，經16SrRNA 基因比對，鑒定該菌株為植物乳桿菌，命名為植物乳桿菌ZJUF HN9(LactobacillusplantarumZJUF HN9)。植物乳桿菌ZJUF HN9的16S rRNA的堿基序列如SEQ ID NO.1所示。將植物乳桿菌ZJUF HN9于2017年6月16日保藏于中國典型培養物保藏中心(地址：中國， 武漢，武漢大學)，保藏號為：CCTCC NO:M 2017341。

體外實驗證明，植物乳桿菌ZJUF HN9具有耐受胃腸道轉運液的能力，在模擬人工胃腸 道環境中具有很高的生存率，而且能耐受較高濃度(1.8％)的膽鹽，有利于其在胃腸道中存活 或繁殖。植物乳桿菌ZJUF HN9自凝率24小時達到84％，能夠選擇性粘附革蘭氏陰性菌(特 指大腸桿菌和鼠傷寒沙門氏菌)，其在腸道中與致病菌凝集，并順利排出體外，有利于腸道健 康。植物乳桿菌ZJUF HN9能夠顯著抑制胃腸道致病菌的繁殖，如大腸桿菌、鼠傷寒沙門氏 菌、金黃色葡萄球菌、李斯特菌。因此，植物乳桿菌ZJUF HN9可用于預防或調節胃腸道菌 群失衡。

本發明的另一個目的是提供植物乳桿菌ZJUF HN9在制備抑制胃腸道致病菌的藥物或食 品中的應用。

作為優選，所述胃腸道致病菌為大腸桿菌或鼠傷寒沙門氏菌。