[發明專利]一種肌鈣蛋白I檢測試劑及其制備和檢測方法

在審

• 申請號: 201711403111.7
• 申請日: 2017-12-22
• 公開（公告）號: CN108037282A
• 公開（公告）日: 2018-05-15
• 發明（設計）人: 丁蘭艷;趙慧敏;嚴芳芳;王亞盟;杜愛銘;徐兵
• 申請（專利權）人: 太原瑞盛生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/535
• 分類號: G01N33/535;G01N33/558
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及了一種肌鈣蛋白I檢測試劑及其制備和檢測方法，具體涉及一種肌鈣蛋白I免疫檢測試劑及其制備與檢測方法，包括：酶標肌鈣蛋白I、用于檢測肌鈣蛋白I抗體—酶標肌鈣蛋白I復合物的指示試劑。本發明制備得到的含有上述酶標肌鈣蛋白I的均相酶免疫檢測試可以方便、快速、準確地確定樣品中的肌鈣蛋白I的含量，并且可以在全自動生化分析儀上同時測定多個樣品，實現了肌鈣蛋白I的高通量快速化測定，靈敏度高，特異性強，結果準確，原料低廉，對檢測人員的要求不高，有利于臨床大規模推廣使用。

技術領域

本發明涉及一種肌鈣蛋白I檢測試劑及其制備和檢測方法，具體涉及一種肌鈣蛋白I均相酶免疫檢測試劑及其制備和檢測方法。

背景技術

心肌肌鈣蛋白(Cardiac Troponin，cTn)是肌鈣蛋白復合體中與心肌收縮功能有關的一組蛋白，由心肌肌鈣蛋白T（cTnT，分子量37 kD）、心肌肌鈣蛋白I（cTnI，分子量21kD）和心肌肌鈣蛋白C（cTnC，分子量37 kD）三個亞單元組成的蛋白復合物。cTnI 是復合物中的抑制亞單元，有防止肌肉收縮的作用。它以不同形式存在于心肌細胞中，以游離形式存在于胞漿內的cTnI只占很少部分且為可溶性的，大部分與肌鈣蛋白T及C亞單位結合以復合體形式存在。cTnI是一個非常敏感和特異的心肌梗死(AMI)標志物。在AMI心肌細胞損傷時，游離于心肌細胞質內的cTnI迅速釋出，血清水平于4-8h或更早即可升高。隨著壞死的肌原纖維不斷崩解破壞，固定于其上的cTnI不斷釋放入血，血清cTnI水平常于11-24h后達峰值，約l周后降至正常，部分病例14天時仍可測到。這就使得發病后僅數小時的早期就診者與遲到2-5天的病人均可通過測定血清cTnI得出診斷。

目前，體外定量測定肌鈣蛋白I主要使用放射免疫、酶聯免疫吸附試驗、化學或電化學發光免疫法、熒光免疫法等。放射免疫由于放射性污染的原因，已經基本被其他方法所取代；酶聯免疫吸附試驗以前自動化程度不高，所以重復性不是很好，目前隨著自動化程度的普及，已經有了很大改善，但這種方法影響因素較多，存在分離和洗滌步驟繁瑣、測定周期偏長等問題，限制了其應用。化學或電化學發光免疫法、熒光免疫法由于需要特殊的設備，導致成本較高，使用范圍受到一定的限制，因此難以滿足行業發展需要，對肌鈣蛋白I檢測試劑進行改進十分必要。

臨床上對肌鈣蛋白I的檢測靈敏度及特異性要求很高，雖然目前市場上測定肌鈣蛋白I的試劑有很多廠家，但是不管是試劑的靈敏度還是試劑的特異性都很難滿足臨床檢測要求，這是因為肌鈣蛋白I在正常人血清中含量極低，在0.8 ng/mL以下，而大多數檢測試劑極限在1ng/mL，而且在此檢測極限情況下，影響測定結果的因素也被成倍放大。

均相酶免疫檢測法，以其檢測速度快、操作簡單、靈敏度高、特異性強且可以在全自動生化分析儀上實現對檢測物質的高通量快速化檢測的優點，得到越來越多的關注。

發明內容

本發明要解決的技術問題在于，針對現有技術上的各種缺陷，提供一種既安全又可快速、方便、靈敏、準確的檢測出待測樣本中肌鈣蛋白I含量的肌鈣蛋白I均相酶免疫檢測試劑及其制備方法，以及可以與各種類型的自動生化分析儀聯用、對檢測人員要求不高的肌鈣蛋白I均相酶免疫檢測方法。

為了實現上述目標，本發明采用的技術方案是：

一種肌鈣蛋白I均相酶免疫檢測試劑，其特征在于，包括：酶標肌鈣蛋白I以及用于檢測肌鈣蛋白I抗體—酶標肌鈣蛋白I復合物的指示試劑。

上述指示試劑選自酶試劑、熒光試劑或化學發光試劑。

前述的肌鈣蛋白I均相酶免疫檢測試劑，上述指示劑選自酶試劑，包括：酶標偶聯物和酶的底物；上述酶標偶聯物包括葡萄糖脫氫酶—酶標抗原偶聯物；上述酶的底物為葡萄糖。

前述的肌鈣蛋白I均相酶免疫檢測試劑，上述葡萄糖脫氫酶—酶標抗原偶聯物由葡萄糖脫氫酶與肌鈣蛋白I偶聯形成。