[發(fā)明專利]一種CuInS/ZnS量子點及檢測堿性磷酸酶的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201711402342.6
• 申請日: 2017-12-22
• 公開（公告）號: CN108084995B
• 公開（公告）日: 2019-07-30
• 發(fā)明（設計）人: 宋大千;張芳梅;馬品一;王興華;孫穎
• 申請（專利權）人: 吉林大學
• 主分類號: C09K11/62
• 分類號: C09K11/62;G01N21/64;B82Y20/00;B82Y30/00;B82Y40/00
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 劉奇

本發(fā)明涉及生化檢測技術領域，公開了一種CuInS/ZnS量子點及利用該量子點檢測堿性磷酸酶的方法。以CuInS/ZnS量子點做為堿性磷酸酶水解4?硝基苯磷酸二鈉體系中的探針，在λex/λem＝405/588nm條件下測定熒光強度，通過熒光強度的變化以及堿性磷酸酶與熒光強度的線性關系，得到堿性磷酸酶的含量。本發(fā)明制備的CuInS/ZnS量子點最佳激發(fā)波長為405nm，與PNP的最大底物吸收峰重疊，能夠產(chǎn)生內(nèi)濾效應，從而達到檢測ALP的目的。檢測靈敏度高，抗干擾能力強，樣品要求低，能夠實現(xiàn)對血清樣品的直接檢測。

技術領域

本發(fā)明涉及半導體量子點合成、分析化學、生化檢測技術領域，特別是涉及一種CuInS/ZnS量子點及利用該量子點作為納米熒光探針檢測堿性磷酸酶的方法。

背景技術

目前，臨床檢測血清中ALP采用的方法是比色法，此法以4-硝基苯磷酸二鈉(PNPP)為底物，在ALP存在條件下，PNPP與ALP反應產(chǎn)生游離酚(對硝基苯酚PNP)和磷酸，酚在堿性溶液中與4-氨基安替比林作用，經(jīng)鐵氰化鉀氧化形成紅色醌類化合物，其紅色深淺與ALP活性成正比。在37℃條件下，每100mL血清與底物作用15分鐘，產(chǎn)生1mg酚的ALP活性為1個金氏單位(U)。以蒸餾水調零點，在510nm處讀取各管吸光度(紫外分光光度計)。該方法對樣品需要量大，樣品前處理復雜，靈敏度低，選擇性差，抗干擾能力不足。由于臨床樣品(如全血)中的復雜組分會對檢測結果造成干擾，因此只能用于成分相對簡單而顯色又不易受到干擾的體系，檢測前都需要對樣品進行離心分離等預處理，并不能直接用于分析實際血液樣品。底物溶液中不得含有酚類物質，血清樣品需要量為100μL；檢測下限未知。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明的目的是提供一種快速檢測堿性磷酸酶的方法，該方法可以直接對人血清進行測定，每測一個樣品僅需20μl血清，檢測靈敏度高，抗干擾性強，操作簡便，可實現(xiàn)快速測定。

本發(fā)明的另外一個目的還在于提供上述CuInS/ZnS量子點及其制備方法。

為了達到上述目的，本發(fā)明的技術方案如下：

一種CuInS/ZnS量子點的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)將可溶性銅源化合物、銦源化合物及巰基脂肪酸與水混合，調節(jié)pH值至8～10，得到混合液；

所述混合液中，Cu²⁺和In³⁺的摩爾比為0.015～0.045：0.015～0.120；Cu²⁺和In³⁺的物質的量之和與巰基脂肪酸的摩爾比為0.03～0.06：0.24～0.90；

(2)攪拌條件下，將所述步驟(1)得到的混合液與硫源化合物混合，微波輔助加熱使混合后溶液溫度在4min以內(nèi)升溫至90～100℃，保持溫度1～10min，得到含有CuInS核的反應液；

(3)待步驟(2)得到的反應液冷卻至低于50℃后，向反應液中加入鋅源溶液和硫源溶液，在90～100℃下微波加熱反應1～10min，得到CuInS/ZnS量子點。

優(yōu)選的，步驟(1)中，所述銅源化合物為碘化銅或氯化銅，所述銦源化合物為醋酸銦或氯化銦，所述巰基脂肪酸為主鏈長度為2～8個碳原子的巰基脂肪酸。

步驟(2)中，所述硫源化合物為Na₂S。

更優(yōu)選的，步驟(1)中，所述Cu²⁺的摩爾含量為0.015～0.045mmol；步驟(2)中，所述Na₂S的摩爾含量為0.02～0.06mmol。

優(yōu)選的，步驟(3)中，所述鋅源溶液為Zn(Ac)₂溶液，所述硫源溶液為Na₂S溶液。