[發明專利]梅毒重組多價融合抗原、梅毒重組抗原質粒和梅毒重組抗原菌株及其制備方法及試劑盒在審
| 申請號： | 201711397195.8 | 申請日： | 2017-12-21 |
| 公開（公告）號： | CN108059683A | 公開（公告）日： | 2018-05-22 |
| 發明（設計）人： | 韓雪;屈曉展;崔勇青;胡子穎;高博 | 申請（專利權）人： | 江漢大學 |
| 主分類號： | C07K19/00 | 分類號： | C07K19/00;C12N15/70;C12N1/21;G01N33/571 |
| 代理公司： | 北京三高永信知識產權代理有限責任公司 11138 | 代理人： | 呂耀萍 |
| 地址： | 430056 湖北省武漢市*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 梅毒 重組 融合 抗原 質粒 菌株 及其 制備 方法 試劑盒 | ||
1.一種梅毒重組多價融合抗原，其特征在于，所述梅毒重組多價融合抗原的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO:1所示。
2.一種梅毒重組抗原質粒，其特征在于，所述梅毒重組抗原質粒包括如SEQ ID NO:2所示的梅毒重組多價融合抗原基因。
3.一種制備權利要求2所述的梅毒重組抗原質粒的方法，其特征在于，所述方法包括：
將序列如序列表中SEQ ID NO:2所示的梅毒重組多價融合抗原基因連接到PET-HIS-28a載體上，得到所述梅毒重組抗原質粒。
4.一種梅毒重組抗原菌株，其特征在于，所述梅毒重組抗原菌株包括序列如SEQ IDNO:2所示的梅毒重組多價融合抗原基因。
5.一種制備權利要求4所述的梅毒重組抗原菌株的方法，其特征在于，所述方法包括：
將序列如序列表中SEQ ID NO:2所示的梅毒重組多價融合抗原基因連接到PET-HIS-28a載體上，得到所述梅毒重組抗原質粒；
將所述梅毒重組抗原質粒轉入大腸桿菌中，得到所述梅毒重組抗原菌株。
6.一種利用權利要求4所述的梅毒重組抗原菌株制備梅毒重組多價融合抗原的方法，其特征在于，所述方法包括：
將所述梅毒重組抗原菌株進行活化培養；
將活化后的所述梅毒重組抗原菌株進行擴大培養后，加入誘導劑進行表達培養；
收集所述梅毒重組抗原菌株并進行超聲破碎，通過純化后得到所述梅毒重組多價融合抗原。
7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述活化培養的培養溫度為37℃，所述活化培養的培養時間為14-16h；所述擴大培養的培養溫度為37℃，所述擴大培養的培養時間為2.5h，所述表達培養的溫度為18℃，所述表達培養的培養時間為14h。
8.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述純化的方法包括：將破碎的所述梅毒重組菌株進行離心，得到上清液，將所述上清液利用鎳柱層析柱進行層析，并利用洗脫液進行洗脫，得到含有所述梅毒重組多價融合抗原的洗脫液，將洗脫液進行復性透析，得到純化的所述梅毒重組多價融合抗原。
9.一種用于檢測梅毒的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括包被液，所述包被液包括序列如序列表中SEQ ID NO:1所示的梅毒重組多價融合抗原。
10.根據權利要求9所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括：第一抗體、第二抗體、洗脫液、封閉液、顯色液和終止顯色劑，其中，所述第一抗體包括梅毒抗體陰性對照血清樣本和待測血清樣本，所述第二抗體為辣根過氧化酶標記的兔抗人免疫球蛋白抗體。
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