[發明專利]一種煙草對煙草鐮刀菌根腐病抗性的鑒定方法

在審

• 申請號: 201711389998.9
• 申請日: 2017-12-21
• 公開（公告）號: CN108085363A
• 公開（公告）日: 2018-05-29
• 發明（設計）人: 李雪君;孫計平;李芳芳;平文麗;孫煥;李耀宇;丁燕芳;馬彩娟;李旭輝;俎煥新;侯詠;王滿
• 申請（專利權）人: 河南省農業科學院煙草研究所
• 主分類號: C12Q1/18
• 分類號: C12Q1/18
• 代理公司: 鄭州博派知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 41137
• 代理人: 方燕玉

本發明公開了一種煙草對煙草鐮刀菌根腐病抗性的鑒定方法，包括以下步驟：步驟一、煙草鐮刀菌病菌培養；步驟二、菌液的制備；步驟三、煙苗的培育；步驟四、煙苗的前處理；步驟五、接菌；步驟六、調查；最后根據發病情況，即可檢測出品種對鐮刀菌根腐病的抗性。本發明的鑒定方法具有以下特點，第一，直接利用煙苗鑒定，與移栽到盆內或大田接種病菌相比較，具有以下優點：1、可以省去移栽后盆栽培養煙株繁瑣的工作，降低了工作量；漂盤接種，一批可以接種幾百?幾千個植株，擴大了接種量；苗期直接接種，還大幅度的縮短鑒定所需的時間。2、使煙草對鐮刀菌根腐病的抗性不受生長季節限制，任何季節都能展開鑒定工作等優點。

技術領域

發明涉及煙草病害鑒定技術領域，具體涉及一種煙草對煙草鐮刀菌根腐病抗性的鑒定方法。

背景技術

煙草是重要的經濟作物，其病害種類很多，以根莖類病害損失最為嚴重。長期以來煙草根莖類病害以黑脛病發生較多。近年來，隨著連作的面積擴大，根莖類病害日益嚴重，除了黑脛病外，一種新的病害正在蔓延擴展，即鐮刀菌根腐病。黑脛病的發生已經引起了高度的關注，所以在品種培育、抗性鑒定、栽培措施、藥物防治等手段上，都有深入的研究。鐮刀菌根腐病在煙草上發現較晚，其研究主要集中在病原菌的鑒定、分離等方面，病害的鑒定研究很少見到。

鐮刀菌屬于土壤習居菌，種類繁多，分布很廣，可侵染多種植物(糧食作物、經濟作物、藥用植物及觀賞植物)引起植物的根腐、莖腐、花腐和穗腐等。鐮刀菌產孢能力很強，孢子傳播途徑很多，除土傳外還可以通過空氣傳播，侵染植物維管束系統，破壞植物的輸導組織。許多研究表明鐮刀菌在植物的生長發育過程中還產生毒素，造成植物萎蔫死亡。鐮刀菌病害在生產上屬于防治最困難的重要病害之一，目前主要采用抗病育種及生物防治方法，但這些方法的使用因條件限制有一定程度的局限性。化學防治只能以預防為主，植物一旦受到侵染其治病效果甚微。只有充分認識到病原菌對植物的作用機理，才能找到最經濟、有效、環保的防治措施。

研究認為，在河南省引起煙草枯萎病與根腐病的鐮刀菌種類較多，其中茄病鐮刀菌(F.oxysporum)和尖孢鐮刀菌(F.oxysporum)是引起煙草根腐病和枯萎病的主要致病菌。目前，要培育出抗病品種，首先要對資源材料做抗性鑒定，在鑒定的基礎上，再進一步進行機理、分子方面的研究。所以準確快速有效的鑒定是對煙草抗源的挖掘、利用和抗病品種選育的首要環節。

研究認為，在河南省引起煙草枯萎病與根腐病的鐮刀菌種類較多，其中茄病鐮刀菌(F.oxysporum)和尖孢鐮刀菌(F.oxysporum)是引起煙草根腐病和枯萎病的主要致病菌。目前，要培育出抗病品種，首先要對資源材料做抗性鑒定，在鑒定的基礎上，再進一步進行機理、分子方面的研究。所以準確快速有效的鑒定是對煙草抗源的挖掘、利用和抗病品種選育的首要環節。

目前的鑒定方法:目前，沒有鐮刀菌根腐病抗性的鑒定標準，在文獻中能找到的是在其它研究種關于該病的接種方法，一種是利用鐮刀菌粗毒素經提取純化后處理剛出芽的煙苗(煙草鐮刀菌根腐病病菌致病粗毒素的研究，趙杰)；另一種是利用菌餅接種10葉期的煙苗，在煙苗根莖部用接種針針刺傷口，把制好的菌餅貼于傷口處，用脫脂棉蘸取無菌水包裹在接種處(河南煙草鐮刀菌的初步分子鑒定，田艷艷)，這兩種方法均能達到使煙株發病的目的，但對品種發病程度起不到鑒定的作用。

發明內容

針對現有煙草鐮刀菌根腐病抗性鑒定技術存在的不足，本發明的目的在于提供一種快速鑒定煙苗對煙草鐮刀菌根腐病抗性的方法，可有效地鑒別煙草鐮刀菌根腐病。

本發明解決問題的技術方案是：

一種煙草對煙草鐮刀菌根腐病抗性的鑒定方法，包括以下步驟：