[發(fā)明專利]一種乙酰氨基葡萄糖偶聯(lián)物的制備方法及應(yīng)用

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711379358.X
• 申請(qǐng)日: 2017-12-15
• 公開（公告）號(hào): CN109879967A
• 公開（公告）日: 2019-06-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李振軍;陳菲
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 蘇州和銳生物科技有限公司
• 主分類號(hào): C07K19/00
• 分類號(hào): C07K19/00;C07K16/44;G01N33/68
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• 代理人: 暫無(wú)信息

1.一種式I所示乙酰氨基葡萄糖偶聯(lián)物，其特征在于，糖基間以beta-1，4糖苷鍵連接，其中乙酰氨基葡萄糖數(shù)量n為大于1或等于1的整數(shù)，R為載體物質(zhì)，與其中一個(gè)糖基的2號(hào)位NH2以肽鍵連接。

2.一種乙酰氨基葡萄糖偶聯(lián)物的制備方法，其特征在于，式I中的游離-NH2與載體物質(zhì)中的-COOH的脫水縮合反應(yīng)形成偶聯(lián)物，包括以下步驟：

1)與生物素反應(yīng)

①取生物素、二環(huán)己基碳二亞胺(DCC)和N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)溶于DMF中，攪拌反應(yīng)，離心收集上清液；

②取式I乙酰氨基葡萄糖溶于緩沖液中；

③將①中溶液攪拌下逐滴加入到②所得溶液中，攪拌反應(yīng)；

④緩沖液透析，得到偶聯(lián)物。

2)與蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)片段、合成多肽或半合成多肽反應(yīng)

取蛋白質(zhì)或多肽、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺(EDC)和式I乙酰氨基葡萄糖溶于DMF中，攪拌反應(yīng)；緩沖液透析，得到偶聯(lián)物。

3.權(quán)利要求2所述的載體物質(zhì)，為含有-COOH的有機(jī)物，包括但不限于生物素、蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)片段、合成多肽或半合成多肽。

4.權(quán)利要求3所述的蛋白質(zhì)，其特征在于，包括但不限于親和素(SA)、牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)、銅藍(lán)蛋白(KLH)、牛甲狀腺球蛋白(BTG)。

5.一種乙酰氨基葡萄糖抗原的應(yīng)用，其特征在于，用權(quán)利要求4所述乙酰氨基葡萄糖抗原免疫動(dòng)物，獲得抗乙酰氨基葡萄糖抗體。

6.一種抗乙酰氨基葡萄糖抗體檢測(cè)方法，該抗體來(lái)自糞便和/或體液，通過(guò)與權(quán)利要求1～4所述的乙酰氨基葡萄糖偶聯(lián)物的免疫反應(yīng)來(lái)進(jìn)行，其中在免疫反應(yīng)中使用所述乙酰氨基葡萄糖偶聯(lián)物與固相載體結(jié)合，檢測(cè)所述抗乙酰氨基葡萄糖抗體。

7.權(quán)利要求6所述的固相載體，其特征在于，包括但不限于熒光微球、樹脂微球、磁性微球、膠體金顆粒、微孔板、薄膜、微孔膜、硝酸纖維素膜。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，所述體液為血液。

9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，所述體液為血清。