[發明專利]一種左旋苯甘氨酸乙基鄧鉀鹽的分析方法

有效

• 申請號: 201711373013.3
• 申請日: 2017-12-19
• 公開（公告）號: CN108088929B
• 公開（公告）日: 2020-05-29
• 發明（設計）人: 張軍立;段志鋼;李珠;劉倩;王新輝;穆軍明;崔克嬌;馬金玉;李金素;張致一;薛同山;趙慶年;付成名;段素英;趙彬;臧飛;宋斌;師書迪;楊婷;程璐英;李小瑞
• 申請（專利權）人: 天津大學;華北制藥股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/74
• 代理公司: 石家莊國域專利商標事務所有限公司 13112
• 代理人: 白海靜;蘇艷肅

本發明提供了一種左旋苯甘氨酸乙基鄧鉀鹽的分析方法，采用高效液相色譜法測定左旋苯甘氨酸乙基鄧鉀鹽被測樣品中左旋苯甘氨酸、左旋苯甘氨酸乙基鄧鉀鹽的含量，采用C₁₈色譜柱，以乙腈與異丙醇、乙腈與四氫呋喃或乙腈與二氧六環的混合溶液為流動相，通過制備對照品溶液、被測樣品溶液，采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，在合適的色譜條件下，分別精密量取被測樣品溶液和對照品溶液注入液相色譜儀；記錄被測樣品和對照品的色譜圖，按外標法以峰面積計算，即得被測樣品中左旋苯甘氨酸和左旋苯甘氨酸乙基鄧鉀鹽的含量。本發明操作過程簡單方便，精確度高，穩定性好，可有效避免雜質對測定結果的影響。

技術領域

本發明涉及一種抗生素原料的分析方法，具體地說是涉及一種左旋苯甘氨酸乙基鄧鉀鹽的分析方法。

背景技術

左旋苯甘氨酸乙基鄧鉀鹽用于氨芐青霉素、氧哌嗪青霉素、頭孢氨芐、頭孢氯氨芐等半合成抗生素的中間體，其結構式如下：

目前，國內企業左旋苯甘氨酸乙基鄧鉀鹽含量檢測方法為酸堿滴定法，但這一方法操作復雜，精確度較差。

現有文獻(河北工業科技,2011,28(5),288～290)已報道采用Thermos C18色譜柱，流動相為0.01mol/L磷酸鹽緩沖液(含0.2％(體積分數)三乙胺，85％(體積分數)磷酸，調節pH值為3.0)，乙腈(體積比為5∶95)為流動相，檢測波長為220nm。樣品在pH值為2.0條件下水解后，以水解產物苯甘氨酸為外標，計算左旋苯甘氨酸乙基鄧鉀鹽的含量。此方法是間接測定方法，易受原料苯甘氨酸殘留的影響。因此，亟需對檢測方法進行改進，提高精確度。

發明內容

本發明的目的就是提供一種左旋苯甘氨酸乙基鄧鉀鹽的分析方法，以解決現有方法操作復雜，易受雜質影響，精確度差的問題。

本發明的目的是這樣實現的：

一種左旋苯甘氨酸乙基鄧鉀鹽的分析方法，采用高效液相色譜法測定左旋苯甘氨酸乙基鄧鉀鹽被測樣品中左旋苯甘氨酸、左旋苯甘氨酸乙基鄧鉀鹽的含量，采用C₁₈色譜柱，以體積比A∶B＝90∶10～70∶30的混合溶液為流動相，其中，A為乙腈，B為異丙醇、四氫呋喃或二氧六環，具體包括如下步驟：

(a)對照品溶液的制備：精密稱定左旋苯甘氨酸標準品、左旋苯甘氨酸乙基鄧鉀鹽標準品，分別加流動相溶解，并定量稀釋制成濃度為0.02～0.5mg/mL的左旋苯甘氨酸標準對照品溶液、左旋苯甘氨酸乙基鄧鉀鹽標準對照品溶液，搖勻、定容；

(b)被測樣品溶液的制備：精密稱定左旋苯甘氨酸乙基鄧鉀鹽樣品，分別加流動相溶解，并定量稀釋制成濃度為0.02～0.5mg/mL的左旋苯甘氨酸乙基鄧鉀鹽被測樣品溶液，搖勻、定容；

(c)色譜條件：采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，流動相流速為0.2～2.0mL/min；檢測波長為285～300nm；柱溫為20℃～30℃；理論塔板數按主峰計算應不低于2000；

(d)測定法：分別精密量取被測樣品溶液和對照品溶液各10μL，注入液相色譜儀；記錄被測樣品和對照品的色譜圖，按外標法以峰面積計算，即得被測樣品中的左旋苯甘氨酸和左旋苯甘氨酸乙基鄧鉀鹽的含量。

所述流動相為乙腈與異丙醇的混合溶液，所述乙腈與異丙醇的體積比為90∶10～70∶30，優選乙腈與異丙醇的體積比85∶15。

所述流動相為乙腈與四氫呋喃的混合溶液，所述乙腈與四氫呋喃的體積比為85∶15。

所述流動相為乙腈與二氧六環的混合溶液，所述乙腈與二氧六環的體積比為85∶15。

所述流動相的流速為1.0～1.4mL/min；優選地，所述流動相的流速為1.2mL/min。