[發明專利]一種檢測抗體類藥物與人體和動物正常組織交叉反應的方法

在審

• 申請號: 201711367415.2
• 申請日: 2017-12-18
• 公開（公告）號: CN108106910A
• 公開（公告）日: 2018-06-01
• 發明（設計）人: 李寧;楊鳳英;周雷;車彤彤;李殿香;胡楊
• 申請（專利權）人: 濟南大學
• 主分類號: G01N1/30
• 分類號: G01N1/30;G01N1/42;G01N33/50
• 代理公司: 濟南舜源專利事務所有限公司 37205
• 代理人: 于曉曉

1.一種檢測抗體類藥物與人體和動物正常組織交叉反應的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)人體和動物組織標本的固定和包埋；

(2)人體和動物組織芯片的制備；

(3)人體和動物組織標本的切片與排布；

(4)抗體類藥物的標記；

(5)采用免疫組織化學方法檢測抗體類藥物與人體和動物正常組織交叉反應。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)中，采集的步驟為：動物麻醉后摘取新鮮組織，剔除結締組織和多余脂肪，用生理鹽水沖掉殘留的血液并用吸水紙吸凈水分；人體組織采用活檢組織或手術標本；

動物組織來源于以下種屬：大鼠、小鼠、犬、狨猴、食蟹猴和恒河猴，每個種屬單獨取材并建立組織庫。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于，所述新鮮組織包括以下33種：

腎上腺Adrenal、胱Bladder、血細胞Blood cells、髓Bone marrow、乳腺Breast、小腦Cerebellum、大腦Cerebral Cortex、直腸Colon、內皮Endothelium、眼球Eye、輸卵管Fallopian tube、胃腸道Gastrointestinal tract、心臟Heart、腎臟Kidney、肝臟Liver、肺臟Lung、淋巴結Lymph node、卵巢Ovary、胰腺Pancreas、甲狀旁腺Parathyroid、垂體Pituitary、胎盤Placenta、前列腺Prostate、橫紋肌Striated muscle、皮膚Skin、脊髓Spinal cord、脾臟Spleen、睪丸Testis、胸腺Thymus、甲狀腺Thyroid、輸尿管Ureter、子宮內膜Uterus、子宮頸Uterus；由以上組織構建組織庫用于組織交叉反應試驗。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)中，組織標本的固定方法至少為以下方法中的一種：

①石蠟組織

眼球和睪丸采用Dividson’s固定液，其余組織采用10％中性福爾馬林。在室溫下固定2周以上，按常規方法將組織進行石蠟包埋；

②冰凍組織

采用冰凍組織包埋劑OCT制備的步驟具體如下：

在金屬包埋模具底部涂抹冰凍組織包埋劑，將組織的取材面朝向模具底面，將標注有臟器識別信息的包埋盒置于組織上，注入冰凍組織包埋劑OCT，將包埋模具放入液氮干冰中，靜止1～3min，形成新鮮冰凍組織標本，保存于-60～-80℃冰箱。

5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(2)中，在載玻片1上制備組織芯片，其中，32種組織芯片以4*8的隊列整齊排布，質控組織芯片位于其余32種組織芯片的隊列以外的位置，所述的32種組織芯片不包括血細胞；用于制備組織芯片的組織包括石蠟組織或冰凍組織；切片厚度為3～7μm，冰凍組織芯片保存于-80℃超低溫冰箱中，石蠟組織芯片保存于室溫。

6.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(3)中，將不同個體的同一種組織進行切片，并按照順序依次呈線性排布在同一張載玻片1上，組織的數量為1～4個。

7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟(4)中，用于單克隆抗體和同型對照標記的方法包括生物素、FITC或辣根過氧化物酶。