[發明專利]地衣芽孢桿菌ZL-1及其應用

有效

• 申請號: 201711364361.4
• 申請日: 2017-12-18
• 公開（公告）號: CN108004169B
• 公開（公告）日: 2019-06-07
• 發明（設計）人: 朱紅惠;謝小林;周蓮;陳美標
• 申請（專利權）人: 廣州王道生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P13/04;C12N9/54;C05F15/00;C12R1/10
• 代理公司: 廣州科粵專利商標代理有限公司 44001
• 代理人: 郝文婷;劉明星

本發明公開了地衣芽孢桿菌Bacillus licheniformis ZL?1及其應用。本發明地衣芽孢桿菌Bacillus licheniformis ZL?1從羽毛聯合食用菌渣的高溫堆體中分離篩選得到，保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏編號為GDMCC No.60284，保藏地址為廣州市先烈中路100號大院59號樓5樓，保藏日期為2017年11月24日。經實驗測定，本發明地衣芽孢桿菌Bacillus licheniformis ZL?1能夠在純羽毛的液體培養基中培養3天，其角蛋白酶活達到52.14U/mL，對羽毛的降解率達到90.15％。此外，本發明地衣芽孢桿菌Bacillus licheniformisZL?1對高溫和鹽度均有很好的耐受性，能在55℃下良好生長，并耐受14％的鹽度，因此可用于降解羽毛、生產復合氨基酸溶液、利用羽毛為原料進行高溫堆肥發酵、生產復合氨基酸肥料和生產角蛋白酶，具有良好的應用前景和市場價值。

技術領域

本發明屬微生物及其應用技術領域，更具體地說，本發明涉及地衣芽孢桿菌Bacillus licheniformis ZL-1及其應用。

背景技術

羽毛是家禽處理后剩余的廢棄物，在全世界的范圍內，每年有數百萬噸羽毛廢棄物產生，而我國每年產生的廢棄羽毛將近70萬t，固體廢棄物的管理問題成了家禽屠宰企業亟待解決的問題。然而羽毛廢棄物是一種豐富的天然蛋白質資源，其粗蛋白含量高達85％-90％，也含有維生素B₁₂和一些未知的生長因子。羽毛蛋白中除賴氨酸、蛋氨酸的含量明顯較低外，其它動物必需氨基酸的組成略高于魚粉，這意味著利用羽毛蛋白質水解生產復合氨基酸具有潛在的經濟效益。但禽類羽毛中的蛋白質主要由角質蛋白構成，角蛋白中含有較多的胱氨酸，他們之間形成大量的二硫鍵，再加上氫鍵和分子間作用力很難被普通蛋白酶(如胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶等)水解。利用高溫高壓蒸煮、酶解法、膨化、酸堿水解和利用氧化劑或者還原等傳統方法加工處理廢棄羽毛，氨基酸破壞嚴重、酶制劑成本高、能耗高、污染大等問題，而利用微生物對角蛋白進行降解可以提高水解產物的營養價值，降低能耗、成本以及對環境的污染問題，是一種環境友好型的廢棄物資源化利用方式。

自然界中有多種微生物可以降解羽毛角蛋白，自1899年Ward報道了真菌馬爪甲團囊菌能分解角蛋白以來，迄今為止已發現30多種，主要包括細菌類的芽孢桿菌屬、真菌類的曲霉屬和放線菌的鏈霉菌屬。

我國在羽毛角蛋白分解菌的篩選及應用方面的研究落后于國外，分離篩選出的高效菌株并不多，并多是真菌和放線菌，且這些報道的角蛋白降解菌大多生長于常溫環境下(25～35℃)，關于高溫條件下(45℃以上)的角蛋白降解菌報道極少。由于角蛋白酶的最適反應溫度一般在40℃～60℃，以羽毛為原料堆肥發酵中堆體溫度一般在50℃以上，從而給常規的生物處理技術帶來較大困難。因此，篩選在高溫條件下具有穩定性和高效性的角蛋白降解菌也是一個研究熱點。

發明內容

本發明的目的在于：克服現有技術中缺乏高溫條件下的角蛋白降解菌等不足，提供一種在高溫條件下穩定且高效的角蛋白降解菌地衣芽孢桿菌Bacillus licheniformisZL-1及其應用。

為了實現上述發明目的，本發明提供了一種地衣芽孢桿菌Bacilluslicheniformis ZL-1，其是從羽毛聯合食用菌渣的高溫堆體中分離篩選得到，保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏編號為GDMCC No.60284，保藏地址為廣州市先烈中路100號大院59號樓5樓，保藏日期為2017年11月24日。

本發明地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)ZL-1分離后經菌落形態鑒定，結果如下：在NA培養基上培養24h后，菌落粗糙，不透明，邊緣不整齊呈樹根狀，易挑取，菌落直徑為15mm，桿菌，菌體單個，成對或鏈狀排列；革蘭氏染色陽性；芽孢橢圓形，中生偏端生，有莢膜。