[發明專利]地衣芽孢桿菌ZL-1及其應用

有效

• 申請號: 201711364361.4
• 申請日: 2017-12-18
• 公開（公告）號: CN108004169B
• 公開（公告）日: 2019-06-07
• 發明（設計）人: 朱紅惠;謝小林;周蓮;陳美標
• 申請（專利權）人: 廣州王道生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P13/04;C12N9/54;C05F15/00;C12R1/10
• 代理公司: 廣州科粵專利商標代理有限公司 44001
• 代理人: 郝文婷;劉明星

1.地衣芽孢桿菌（Bacillus licheniformis）ZL-1，保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏編號為GDMCC No.60284，保藏地址為廣州市先烈中路100號大院59號樓5樓，保藏日期為2017年11月24日。

2.權利要求1所述的地衣芽孢桿菌ZL-1，其特征在于，其16S rDNA的核苷酸序列如SEQID NO:1所示。

3.權利要求1所述的地衣芽孢桿菌ZL-1，其特征在于，其種子液的培養溫度為45~55℃。

4.權利要求1所述的地衣芽孢桿菌ZL-1在發酵降解羽毛、生產復合氨基酸溶液中的應用。

5.一種降解羽毛、生產復合氨基酸溶液的方法，其特征在于，包括如下步驟：

將羽毛與無機鹽溶液按照1:100的質量比混合，加入5wt%地衣芽孢桿菌ZL-1種子液，在45~55℃、200rpm下培養3天，完成羽毛降解，并得到復合氨基酸溶液；

所述無機鹽溶液成分包括：NaCl 0.5 g/L、NaH₂PO₄ 0.1035 g/L、Na₂HPO₄ 1.3277 g/L；

所述地衣芽孢桿菌ZL-1種子液的制備方法是：將地衣芽孢桿菌ZL-1接種到NA固體平板培養基上，45℃培養24h使其活化，活化后轉接到NB液體種子培養基中培養至對數生長期；

所述地衣芽孢桿菌ZL-1，保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏編號為GDMCCNo.60284，保藏地址為廣州市先烈中路100號大院59號樓5樓，保藏日期為2017年11月24日。

6.根據權利要求5所述降解羽毛、生產復合氨基酸溶液的方法，其特征在于，所述羽毛還經過預處理，預處理方法包括：將羽毛破碎成蓬松絮狀，然后與水按照1:40的質量比混合，調節pH至10，在微波能量為700W的條件下加熱180s。

7.權利要求1所述地衣芽孢桿菌ZL-1在高溫堆肥發酵廢棄羽毛和食用菌渣、生產復合氨基酸肥料中的應用。

8.一種高溫堆肥發酵廢棄羽毛和食用菌渣、生產復合氨基酸肥料的方法，其特征在于，包括如下步驟：

將羽毛和食用菌渣按照碳氮比為20:1~25:1的比例混合得到混合物，加入混合物質量1~2%的地衣芽孢桿菌ZL-1菌劑和混合物質量0.1~0.2%的黑曲霉菌劑，得到總混合物，調節總混合物的含水量至70~75%后放入固體發酵罐中，調節溫度為50~55℃，每天通氣30~60min，連續堆肥7天后，將溫度降至自然溫度，使其自然堆肥發酵14天，得到復合氨基酸肥料；

所述地衣芽孢桿菌ZL-1菌劑的制備方法為：將地衣芽孢桿菌ZL-1接種到發酵培養液中進行發酵，在45~50℃，攪拌速度為180~200 rpm，通氣量為0.5~2 vvm的條件下培養36~48h，得到地衣芽孢桿菌ZL-1菌劑；所述發酵培養液配方為：葡萄糖 1.5 g/L、玉米粉1.5 g/L、豆粕2.0 g/L、氯化鈉0.5 g/L；

所述黑曲霉菌劑的制備方法為：將黑曲霉菌種接種到麩皮培養基中進行發酵，在37℃下淺盤靜止培養3~5天，得到黑曲霉菌劑；所述麩皮培養基的配方為：麩皮：磷酸二氫鉀：水的質量比=1000:5:1000；

所述地衣芽孢桿菌ZL-1，保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏編號為GDMCCNo.60284，保藏地址為廣州市先烈中路100號大院59號樓5樓，保藏日期為2017年11月24日。

9.權利要求1所述地衣芽孢桿菌ZL-1在生產角蛋白酶中的應用。