[發明專利]一種鯡魚硫酸魚精蛋白的制備方法在審
| 申請號： | 201711358481.3 | 申請日： | 2017-12-17 |
| 公開（公告）號： | CN109929022A | 公開（公告）日： | 2019-06-25 |
| 發明（設計）人： | 劉乃山;夏襯來;于曉娜 | 申請（專利權）人： | 青島冠龍生物制藥有限公司 |
| 主分類號： | C07K14/46 | 分類號： | C07K14/46;C07K1/14;C07K1/16 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 266300 山東省青島市*** | 國省代碼： | 山東;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 硫酸魚精蛋白 制備 預處理 凝膠過濾層析 歐洲藥典標準 規模化生產 析出 工藝步驟 硫酸酸解 色譜純度 實驗研究 提取純化 血凝作用 凍干 肝素 生產工藝 脫水 中和 優化 改進 | ||
1.一種鯡魚硫酸魚精蛋白的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
預處理：取冷凍的鯡魚魚白解凍，加入冷水后置于組織搗碎機中搗碎，用四層紗布過濾得漿液；
硫酸酸解：向上述漿液中加入硫酸溶液，酸解,5100хg離心；收集上清液，用NaOH溶液調節pH,5100хg離心；
低溫析出：收集上清液，靜置，傾去上層清液，向下層沉淀物中加水溶解；
凝膠過濾層析：將上述濃縮液上樣于Sephadex G-25 凝膠柱，用含KCl 的Tris-HCl 緩沖液平衡，紫外檢測儀檢測并記錄，洗脫酶活性峰；
脫水：固體用無水乙醇脫水兩次，離心，棄去上清液，留取沉淀物；
凍干：將步驟( 5 )的沉淀物裝入盤進凍干機，凍干即得硫酸魚精蛋白。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（1）中，所述的水為純化水，所述的魚白與所述的水的質量比為 (1～5)：1。
3.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（2）中，所述的硫酸溶液濃度為0.3%～1.0%，所述的漿液與所述的硫酸溶液的體積比為1: (5～15),酸解時間為1-3h；所述的氫氧化鈉溶液濃度為30%-40%，所述的pH為8~10，所述的離心時間為20-30分鐘。
4.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（3）中，所述的靜置溫度為0-4℃，靜置時間為12-16h;所述的水為純化水，所述的水溫度為50-70℃，所述的沉淀物與水的比例為1：（3-10）（w/v）。
5.如權利要求1所述的方法，其特征在于，步驟（4）中所述的平衡液是pH 7.0～9.0 含0.01～0.20mol/L KCl 的Tris-HCl 緩沖液。
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