[發(fā)明專利]一種檢測(cè)食品中廣譜型沙門氏菌的試紙條及其制備、使用方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711351523.0
• 申請(qǐng)日: 2017-12-15
• 公開（公告）號(hào): CN109932505A
• 公開（公告）日: 2019-06-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 翁文川;陳聲;郭九標(biāo);凌莉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣東出入境檢驗(yàn)檢疫局檢驗(yàn)檢疫技術(shù)中心;香港理工大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N33/532
• 分類號(hào): G01N33/532;G01N33/543;G01N33/559
• 代理公司: 深圳中一聯(lián)合知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44414
• 代理人: 張全文

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體公開一種檢測(cè)食品中廣譜型沙門氏菌的試紙條及其制備、使用方法。所述試紙條，包括PVC底板及結(jié)合在PVC底板至少一表面中段的硝酸纖維素膜，設(shè)置在所述PVC底板至少一表面的一端、且與所述硝酸纖維素膜鄰接的吸水濾紙，設(shè)置在所述PVC底板至少一表面的另一端、且與所述硝酸纖維素膜鄰接的結(jié)合墊，以及設(shè)置在遠(yuǎn)離所述硝酸纖維素膜的一端、且與所述結(jié)合墊鄰接的樣品墊；其中，所述硝酸纖維素膜分別在臨近結(jié)合墊和吸水濾紙?zhí)幵O(shè)有檢測(cè)線和質(zhì)控線。本發(fā)明提供的試紙條能夠快速、簡(jiǎn)便、廣譜地檢測(cè)多個(gè)血清群的沙門氏菌，從而能夠方便快捷地檢測(cè)食品中可能污染的沙門氏菌。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種檢測(cè)食品中廣譜型沙門氏菌的試紙條及其制備、使用方法。

背景技術(shù)

沙門氏菌是最大群腸道性致病菌,主要寄存在畜禽體內(nèi)和蛋類中,具有繁殖速度快,生存能力強(qiáng)等特點(diǎn)。沙門氏菌致病物質(zhì)有菌毛、菌體(O)抗原、內(nèi)毒素和腸毒素。菌毛和O抗原與其侵襲力有關(guān)，內(nèi)毒素導(dǎo)致腸道局部炎癥反應(yīng)和全身性中毒癥狀，部分沙門氏菌可產(chǎn)生霍亂樣腸毒素，導(dǎo)致嚴(yán)重的腹瀉。沙門氏菌具有傳染性,容易引起群發(fā)性感染,造成嚴(yán)重的后果。有報(bào)導(dǎo)表明,人的大多數(shù)沙門氏菌感染直接或間接地與動(dòng)物性食品有關(guān),在世界各國(guó)各類細(xì)菌性的食物中毒中,沙門氏菌食物中毒位居前列。

根據(jù)O抗原可將沙門氏菌分為若干個(gè)O群，根據(jù)O和H抗原的不同組合，可將沙門氏菌劃分為許多血清型，迄今世界上已鑒定出2500多個(gè)不同的沙門氏菌血清型。為了有效控制沙門氏菌病的傳播,就必須有快速和可靠的方法來(lái)檢測(cè)食物及環(huán)境中的沙門氏菌。

傳統(tǒng)的食品中檢測(cè)沙門氏菌的方法主要是用培養(yǎng)法，繁瑣、費(fèi)時(shí)，且存在陽(yáng)性率相對(duì)偏低，不能早期診斷的缺陷。目前應(yīng)用于檢測(cè)沙門氏菌的方法有化學(xué)發(fā)光法、免疫分析方法、免疫層析法、免疫比濁法、酶聯(lián)免疫吸附法以及聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)技術(shù)等，可歸納為以下幾類：

化學(xué)發(fā)光免疫分析方法(CLA)：它是一種測(cè)量超微量活性物質(zhì)(包括藥物、毒物、微生物、激素、蛋白質(zhì))的技術(shù)，是將免疫反應(yīng)與發(fā)光測(cè)定結(jié)合起來(lái)的分析方法，更靈敏，更為準(zhǔn)確，但化學(xué)發(fā)光免疫分析需要專門的設(shè)備，測(cè)試成本高。

酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)：它是繼免疫螢光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來(lái)的一種免疫酶技術(shù)，敏感性很高，穩(wěn)定性好，目前已被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域，目前主要用直接EIA法與夾心ELISA法對(duì)倉(cāng)品中沙門氏菌的檢測(cè)，但是elisa檢測(cè)法時(shí)間長(zhǎng)，操作復(fù)雜。還需配備相應(yīng)設(shè)備，需要實(shí)驗(yàn)室里進(jìn)行操作，不滿足快檢要求。

免疫比濁法：適用于自動(dòng)化分析，但要有專門的儀器，且要求反應(yīng)在10分鐘內(nèi)完成，必須有高活性的抗體和合適的反應(yīng)體系。此法檢測(cè)血清用量大且易受到脂血的影響。

聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)：具有簡(jiǎn)便、快速、敏感性高和特異性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn),已廣泛應(yīng)用于微生物檢測(cè)、遺傳病診斷等諸多領(lǐng)域，但其會(huì)引起的實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的污染和使用的染色劑具有致癌性等影響。

發(fā)明內(nèi)容

針對(duì)現(xiàn)有的檢測(cè)沙門氏菌的方法存在的操作復(fù)雜，檢測(cè)費(fèi)時(shí)，對(duì)設(shè)備要求高等問(wèn)題，本發(fā)明提供一種檢測(cè)食品中廣譜型沙門氏菌的試紙條及其制備方法。

為達(dá)到上述發(fā)明目的，本發(fā)明實(shí)施例采用了如下的技術(shù)方案：

一種檢測(cè)食品中廣譜型沙門氏菌的試紙條，包括PVC底板及結(jié)合在PVC底板至少一表面中部的硝酸纖維素膜，設(shè)置在所述PVC底板至少一表面的一端、且與所述硝酸纖維素膜鄰接的吸水濾紙，設(shè)置在所述PVC底板至少一表面的另一端、且與所述硝酸纖維素膜鄰接的結(jié)合墊，以及與所述結(jié)合墊鄰接、且設(shè)置在遠(yuǎn)離所述硝酸纖維素膜一端的樣品墊；其中，所述硝酸纖維素膜分別在臨近結(jié)合墊和吸水濾紙?zhí)幵O(shè)有檢測(cè)線和質(zhì)控線；所述檢測(cè)線包被有沙門氏菌單克隆抗體SP1；所述質(zhì)控線包被有羊抗兔IgG抗體；所述結(jié)合墊包被有膠體金標(biāo)記的沙門氏菌多單克隆抗體DSP1。