[發明專利]一種檢測食品中廣譜型沙門氏菌的試紙條及其制備、使用方法

在審

• 申請號: 201711351523.0
• 申請日: 2017-12-15
• 公開（公告）號: CN109932505A
• 公開（公告）日: 2019-06-25
• 發明（設計）人: 翁文川;陳聲;郭九標;凌莉
• 申請（專利權）人: 廣東出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心;香港理工大學
• 主分類號: G01N33/532
• 分類號: G01N33/532;G01N33/543;G01N33/559
• 代理公司: 深圳中一聯合知識產權代理有限公司 44414
• 代理人: 張全文

1.一種檢測食品中廣譜型沙門氏菌的試紙條，其特征在于：包括PVC底板及結合在PVC底板至少一表面中段的硝酸纖維素膜，設置在所述PVC底板至少一表面的一端、且與所述硝酸纖維素膜鄰接的吸水濾紙，設置在所述PVC底板至少一表面的另一端、且與所述硝酸纖維素膜鄰接的結合墊，以及設置在遠離所述硝酸纖維素膜的一端、且與所述結合墊鄰接的樣品墊；其中，所述硝酸纖維素膜分別在臨近結合墊和吸水濾紙處設有檢測線和質控線；所述檢測線包被有沙門氏菌單克隆抗體SP1；所述質控線包被有羊抗兔IgG抗體；所述結合墊包被有膠體金標記的沙門氏菌多單克隆抗體DSP1。

2.如權利要求1所述的檢測食品中廣譜型沙門氏菌的試紙條，其特征在于：所述檢測線包被有沙門氏菌多單克隆抗體DSP1；所述質控線包被有羊抗兔IgG抗體；所述結合墊包被有膠體金標記的沙門氏菌單克隆抗體SP1。

3.如權利要求1所述的檢測食品中廣譜型沙門氏菌的試紙條，其特征在于：所述吸水濾紙鄰近所述硝酸纖維素膜的一端疊合設置在所述硝酸纖維素膜表面；和/或

所述結合墊鄰近所述硝酸纖維素膜的一端疊合設置在所述硝酸纖維素膜表面；和/或

所述樣品墊鄰近所述結合墊的一端疊合設置在所述結合墊表面。

4.如權利要求1-3任一項所述的檢測食品中廣譜型沙門氏菌的試紙條的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：

a.利用氯金酸溶液和檸檬酸鈉溶液制備膠體金，得到膠體金溶液；

b.在堿性條件下，向所述膠體金溶液中加入沙門氏菌多單克隆抗體DSP1進行標記處理，經封閉處理、離心、重懸，得到膠體金標記的沙門氏菌多單克隆抗體DSP1；

c.將玻璃纖維素膜置于結合墊處理液中浸泡處理，制備金標墊；用膠體金標記的沙門氏菌多單克隆抗體DSP1對所述金標墊進行噴金處理后，干燥后得到結合墊；

d.取沙門氏菌單克隆抗體SP1、羊抗兔IgG抗體，采用劃膜儀分別劃至硝酸纖維素膜的檢測線、質控線的位置；

e.將玻璃纖維素膜置于樣品墊處理液中浸泡處理，干燥后得到樣品墊；

f.將吸水濾紙貼于PVC底板上，且所述吸水濾紙的一端疊合在所述硝酸纖維素膜的一端表面；將結合墊的一端疊合在所述硝酸纖維素膜的另一端表面；將樣本墊的一端疊合在所述結合墊的另一端表面，進行切割處理，得到檢測食品中廣譜型沙門氏菌的試紙條。

5.如權利要求4所述的檢測食品中廣譜型沙門氏菌的試紙條的制備方法，其特征在于：步驟c、e中，所述浸泡處理的時間為10-60s；和/或

步驟c、e中，所述干燥的的時間為12-18h；和/或

步驟c中，干燥的條件為溫度36-38℃，濕度10％-30％；和/或

步驟e中，干燥的條件為溫度36-38℃。

6.如權利要求4所述的檢測食品中廣譜型沙門氏菌的試紙條的制備方法，其特征在于：所述膠體金溶液的制備方法為：量取純化水裝入錐形瓶中，加熱至340℃，攪拌至沸騰，加入濃度為1％的氯金酸，加熱并快速加入等體積的濃度為2％的檸檬酸鈉，繼續加熱，液體顏色穩定為酒紅色，室溫冷卻，得到粒徑為35-45nm的膠體金溶液。

7.如權利要求4所述的檢測食品中廣譜型沙門氏菌的試紙條的制備方法，其特征在于：所述膠體金標記的沙門氏菌多單克隆抗體DSP1的標記方法為：量取10mL膠體金溶液，加入0.2M的K₂CO₃溶液，至pH為8.2±0.05，放置在速度為70-90rpm的搖床上3-5min，加入150μg沙門氏菌多單克隆抗體DSP1，進行標記處理25-35min，加入100Μ的10％的BSA溶液，進行封閉處理25-35min，15000rpm、4℃離心10-15min，棄上清液，沉淀用600μL金標重懸液重懸，得到膠體金標記的沙門氏菌多單克隆抗體DSP1，2-8℃備用。