[發明專利]同時檢測七種水仙RNA病毒的多重RT-PCR檢測試劑盒及其檢測方法

有效

• 申請號: 201711346493.4
• 申請日: 2017-12-15
• 公開（公告）號: CN107955841B
• 公開（公告）日: 2021-05-11
• 發明（設計）人: 沈建國;高芳鑾;陳細紅;廖富榮;何逸鵬
• 申請（專利權）人: 福建出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/94
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

1.基于7重RT-PCR的鑒定七種水仙RNA病毒的成套引物對，由用于鑒定水仙黃條病毒的特異引物對A、用于鑒定水仙退化病毒的特異引物對B、用于鑒定水仙潛隱病毒的特異引物對C、用于鑒定南芥菜花葉病毒的特異引物對D、用于鑒定水仙普通潛隱病毒的特異引物對E、用于鑒定水仙花葉病毒的特異引物對F和用于鑒定尼潤潛隱病毒的特異引物對G組成；

所述特異引物對A由引物NYSV-F和引物NYSV-R組成；

所述特異引物對B由引物NDV-F和引物NDV-R組成；

所述特異引物對C由引物NLV-F和引物NLV-R組成；

所述特異引物對D由引物ArMV-F和引物ArMV-R組成；

所述特異引物對E由引物NCLV-F和引物NCLV-R組成；

所述特異引物對F由引物NMV-F和引物NMV-R組成；

所述特異引物對G由引物NeLV-F和引物NeLV-R組成；

所述引物NYSV-F為序列表中序列1所示的單鏈DNA分子；

所述引物NYSV-R為序列表中序列2所示的單鏈DNA分子；

所述引物NDV-F為序列表中序列3所示的單鏈DNA分子；

所述引物NDV-R為序列表中序列4所示的單鏈DNA分子；

所述引物NLV-F為序列表中序列5所示的單鏈DNA分子；

所述引物NLV-R為序列表中序列6所示的單鏈DNA分子；

所述引物ArMV-F為序列表中序列7所示的單鏈DNA分子；

所述引物ArMV-R為序列表中序列8所示的單鏈DNA分子；

所述引物NCLV-F為序列表中序列9所示的單鏈DNA分子；

所述引物NCLV-R為序列表中序列10所示的單鏈DNA分子；

所述引物NMV-F為序列表中序列11所示的單鏈DNA分子；

所述引物NMV-R為序列表中序列12所示的單鏈DNA分子；

所述引物NeLV-F為序列表中序列13所示的單鏈DNA分子；

所述引物NeLV-R為序列表中序列14所示的單鏈DNA分子；

所述七種水仙RNA病毒為水仙黃條病毒、水仙退化病毒、水仙潛隱病毒、南芥菜花葉病毒、水仙普通潛隱病毒、水仙花葉病毒和尼潤潛隱病毒。

2.權利要求1所述的成套引物對在如下h1）-h8）任一項中的應用：

h1）制備用于鑒定七種水仙RNA病毒的產品；

h2）鑒定七種水仙RNA病毒；

h3）制備用于鑒定待測病毒是否為七種水仙RNA病毒的產品；

h4）鑒定待測病毒是否為七種水仙RNA病毒；

h5）制備用于鑒別七種水仙RNA病毒的產品；

h6）鑒別七種水仙RNA病毒；

h7）制備用于檢測待測樣品中是否含有七種水仙RNA病毒的產品；

h8）檢測待測樣品中是否含有七種水仙RNA病毒；

所述七種水仙RNA病毒為水仙黃條病毒、水仙退化病毒、水仙潛隱病毒、南芥菜花葉病毒、水仙普通潛隱病毒、水仙花葉病毒和尼潤潛隱病毒。

3.含有權利要求1所述成套引物對的試劑盒，其特征在于

所述試劑盒的功能為如下i1）-i4）中任一種：

i1）鑒定七種水仙RNA病毒中1-7種；

i2）鑒定待測病毒是否為七種水仙RNA病毒；

i3）鑒別七種水仙RNA病毒；

i4）檢測待測樣品中是否含有七種水仙RNA病毒；

所述七種水仙RNA病毒為水仙黃條病毒、水仙退化病毒、水仙潛隱病毒、南芥菜花葉病毒、水仙普通潛隱病毒、水仙花葉病毒和尼潤潛隱病毒，其中所述引物NYSV-F、NYSV-R、NDV-F、NDV-R、NLV-F、NLV-R、ArMV-F、ArMV-R、NCLV-F、NCLV-R、NMV-F、NMV-R、NeLV-F和NeLV-R的摩爾比為1:1:1:1:1:1:4:4:2:2:2:2:4:4。

4.權利要求3所述試劑盒的制備方法，為如下（Ⅰ）或（Ⅱ）：

（Ⅰ）權利要求1所述的成套引物對中各引物對的各條引物分別單獨包裝；

（Ⅱ）權利要求1所述的成套引物對中各引物對的各條引物按權利要求3所述的摩爾比比例混合在一起。