[發明專利]一種森林山蛭抗血栓多肽Sylvestin及其體外表達制備方法和應用有效
| 申請號： | 201711340940.5 | 申請日： | 2017-12-14 |
| 公開（公告）號： | CN108101975B | 公開（公告）日： | 2020-05-15 |
| 發明（設計）人： | 賴仞;方鳴謙;韓亞君 | 申請（專利權）人： | 中國科學院昆明動物研究所 |
| 主分類號： | C07K14/435 | 分類號： | C07K14/435;C12N15/12;C12N15/70;C12N1/21;A61K38/17;A61P7/02;A61P9/10;C12R1/19 |
| 代理公司： | 北京高沃律師事務所 11569 | 代理人： | 劉奇 |
| 地址： | 650500 云*** | 國省代碼： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 森林 山蛭抗 血栓 多肽 sylvestin 及其 體外 表達 制備 方法 應用 | ||
1.一種森林山蛭抗血栓重組多肽Sylvestin，其特征在于，所述重組多肽Sylvestin包括多肽Sylvestin和腸激酶酶切位點片段，所述重組多肽Sylvestin的序列如Seq ID No.3所示。
2.編碼權利要求1所述的重組多肽Sylvestin的核苷酸，所述核苷酸序列如Seq IDNo.4所示。
3.一種重組多肽Sylvestin的重組表達載體，其特征在于，所述表達載體包括如Seq IDNo.4所示的核苷酸序列。
4.一種重組多肽Sylvestin的重組表達菌株，其特征在于，所述重組表達菌株包括權利要求3所述的重組表達載體。
5.一種森林山蛭抗血栓多肽Sylvestin定點突變獲得的改造肽，其特征在于，所述改造肽的氨基酸序列如Seq ID No.5、Seq ID No.6、Seq ID No.7或Seq ID No.8所示。
6.權利要求1所述的多肽Sylvestin的體外表達制備方法，包括以下步驟：
1）構建權利要求4所述的重組表達菌株；
2）誘導所述重組菌株表達，獲得含重組多肽Sylvestin的菌液；所述誘導的溫度為16~30℃，所述誘導的IPTG濃度為0.05~0.55mmol/L，所述誘導的時間為1~18h；
3）從所述菌液中分離純化獲得Seq ID No.3所示氨基酸序列的重組多肽Sylvestin；
4）用腸激酶酶切所述重組多肽Sylvestin，獲得多肽Sylvestin；
所述多肽Sylvestin的氨基酸序列如Seq ID No.1所示。
7.權利要求5所述的改造肽在制備抗血栓藥物中的應用。
8.權利要求5所述的改造肽在制備治療中風藥物中的應用。
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