[發明專利]一種分離測定藥物制劑中溶血磷脂酰膽堿的方法

有效

• 申請號: 201711331161.9
• 申請日: 2017-12-13
• 公開（公告）號: CN107957467B
• 公開（公告）日: 2021-02-26
• 發明（設計）人: 邱永鋒;楊帥兵;薛井中
• 申請（專利權）人: 上海景峰制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟

本發明提供一種分離測定藥物制劑中溶血磷脂酰膽堿的方法，所述方法通過高效液相色譜儀聯用蒸發光檢測器對待測藥物制劑樣品進行分離和檢測，所述高效液相色譜儀對待測藥物制劑樣品進行分離測定時，采用的流動相為無水甲醇?無水乙醇?冰醋酸，三者的體積比為(300?800):(300?800):(15?25)，并調節pH值至5.6?6.4。本發明方法簡單高效，能實現較好分離，分離度大于1.5，精密度高，重復性好，并且對于HPLC色譜柱的性能不會產生影響，不會明顯縮短色譜柱的使用壽命。可以對待測藥物制劑中溶血磷脂酰膽堿的含量進行有效地監測控制，從而可以有效地保障藥品質量。

技術領域

本發明屬于藥物分析領域，涉及一種分離測定藥物制劑中溶血磷脂酰膽堿的方法。

背景技術

前列地爾注射劑是由前列地爾與大豆油、卵磷脂、甘油等輔料經過特定的工藝過程生產而成。其中卵磷脂作為乳化劑，溶血磷脂酰膽堿(LPC)作為卵磷脂固有雜質，如果注射劑中含量過高會對人體健康造成不良的影響。根據藥品QBD質量源于設計的理念，需要對其進行質量控制。然而現有的同類檢測方法對于注射劑的樣品還無法將其很好地分離并實現限度的控制。

CN107085061A公開了一種基于HPLC-MS/MS檢測平臺的溶血磷脂酰膽堿的絕對定量分析方法，該方法建立了HPLC-MS/MS檢測平臺，以利血平為內標繪制LPC14:0-LPC18:0系列物質檢測的標準曲線，并檢測血清的基質效應，該HPLC-MS/MS檢測平臺針對人血清中LPC物質的檢測穩定性和準確性較高，滿足臨床需求，然而該方法無法實現將溶血磷脂酰膽堿在檢測的同時與其他物質的分離。

劉文一等(HPLC-ELSD測定注射用羥喜樹堿脂質體中溶血磷脂酰膽堿的含量，海峽藥學，2009年第21卷第8期，37-40頁)利用HPLC-ELSD測定法測定注射用羥喜樹堿脂質體中溶血磷脂酰膽堿的含量，選擇流動相A為甲醇：氯仿(97:3)，B為2％草酸-乙醇(16:84)，雖然能夠實現溶血磷脂酰膽堿的含量測定，然而其使用這樣的流動相會對HPLC色譜柱的性能產生影響，使得色譜柱的壽命顯著縮短，成本高。

因而，在本領域中，開發一種更加有效地測定藥物制劑中溶血磷脂酰膽堿的方法是非常有必要。

發明內容

針對現有技術存在的問題，本發明的目的在于提供一種分離測定藥物制劑中溶血磷脂酰膽堿的方法，該方法簡單，高效，能夠實現較好分離，而且該方法避免了注射液中其他成分的干擾，具有精密度高，重復性好，并且對于HPLC色譜柱的性能不會產生影響，不會明顯縮短色譜柱的使用壽命。

為達到此發明目的，本發明采用以下技術方案：

本發明提供了一種分離測定藥物制劑中溶血磷脂酰膽堿的方法，所述方法通過高效液相色譜儀聯用蒸發光檢測器(ELSD)對待測藥物制劑樣品進行分離和檢測，所述高效液相色譜儀對待測藥物制劑樣品進行分離測定時，采用的流動相為無水甲醇-無水乙醇-冰醋酸，三者的體積比為(300-800):(300-800):(15-25)，并調節pH值至5.6-6.4。

在本發明中通過對于流動相的特定選擇可以使得HPLC對于待測藥物制劑樣品中物質的分子更加充分，并且能夠避免對HPLC色譜柱的性能的影響，不會明顯縮短色譜柱的使用壽命。并且更加關鍵的是將所述的流動相調節pH值至5.6-6.4(例如5.6、5.7、5.8、5.9、6.0、6.1、6.2、6.3或6.4)，如果pH值偏酸，則出峰變快，分離效果變差，如果pH值偏堿，則出峰變慢，峰型變差。

在本發明中選用無水甲醇-無水乙醇-冰醋酸作為流動相，在實際研究實驗中發現，如果流動相中水的存在過多，會影響到硅膠柱的使用壽命，需要盡量減少流動相中水的含量，所以需要級別較高的無水甲醇，無水乙醇來配置流動相。