[發(fā)明專利]一種動(dòng)物精子活動(dòng)度測(cè)定前的預(yù)處理方法及其應(yīng)用在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201711327639.0 | 申請(qǐng)日: | 2017-12-13 |
| 公開(kāi)(公告)號(hào): | CN109913406A | 公開(kāi)(公告)日: | 2019-06-21 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 鄭明嵐;潘曉靚;張挺;王小康;常艷 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 上海益諾思生物技術(shù)股份有限公司 |
| 主分類號(hào): | C12N5/076 | 分類號(hào): | C12N5/076;C12Q1/02 |
| 代理公司: | 上海弼興律師事務(wù)所 31283 | 代理人: | 薛琦;朱水平 |
| 地址: | 201203 上海市浦東新區(qū)*** | 國(guó)省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 精子 孵育液 預(yù)處理 動(dòng)物精子 附睪尾部 活動(dòng)度 精子活動(dòng)度檢測(cè) 無(wú)血清培養(yǎng)液 精子懸浮液 牛血清蛋白 體積百分比 恒溫孵育 死亡動(dòng)物 孵育 混勻 剪碎 應(yīng)用 配方 優(yōu)化 | ||
1.一種動(dòng)物精子活動(dòng)度測(cè)定前的預(yù)處理方法,其特征在于,其包括以下步驟:
(1)迅速取死亡動(dòng)物的附睪尾部置于(37±1)℃、pH為6.8~7.0的精子孵育液中;所述精子孵育液為含0.3~0.7%牛血清蛋白的無(wú)血清培養(yǎng)液,所述百分比為質(zhì)量體積百分比;
(2)將所述附睪尾部剪碎,于所述精子孵育液中恒溫孵育2~5分鐘后混勻,得精子懸浮液。
2.如權(quán)利要求1所述的預(yù)處理方法,其特征在于,步驟(1)中所述的無(wú)血清培養(yǎng)液為RPMI1640或者DMEM。
3.如權(quán)利要求1所述的預(yù)處理方法,其特征在于,步驟(1)中所述孵育液為含0.5%牛血清蛋白的無(wú)血清培養(yǎng)液,所述百分比為質(zhì)量體積百分比。
4.如權(quán)利要求1所述的預(yù)處理方法,其特征在于,步驟(2)中所述恒溫孵育的時(shí)間不超過(guò)3分鐘。
5.如權(quán)利要求1~4任一項(xiàng)所述的預(yù)處理方法,其特征在于,所述的動(dòng)物為猴、兔子、小鼠或者大鼠。
6.一種非診斷目的的動(dòng)物精子活動(dòng)度的測(cè)定方法,其特征在于,所述測(cè)定方法包括如權(quán)利要求1~5任一項(xiàng)所述的預(yù)處理方法。
7.如權(quán)利要求6所述的測(cè)定方法,其特征在于,所述方法包括:在所述預(yù)處理方法后,將所述精子懸浮液使用計(jì)算機(jī)輔助精子分析儀檢測(cè)其中精子活動(dòng)度。
8.一種精子孵育液,其特征在于,其為含0.3~0.7%牛血清蛋白的無(wú)血清培養(yǎng)液,所述百分比為質(zhì)量體積百分比;較佳地,所述的無(wú)血清培養(yǎng)液為RPMI1640或者DMEM。
9.如權(quán)利要求8所述的精子孵育液,其特征在于,所述精子孵育液的pH為6.8~7.0。
10.一種含0.3~0.7%牛血清蛋白的無(wú)血清培養(yǎng)液在制備精子孵育液中的應(yīng)用,所述百分比為質(zhì)量體積百分比;較佳地,所述的無(wú)血清培養(yǎng)液為RPMI1640或者DMEM。
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