[發明專利]蛋白微陣列檢測用固相基質的制備方法及固相基質

在審

• 申請號: 201711322637.2
• 申請日: 2017-12-13
• 公開（公告）號: CN108107036A
• 公開（公告）日: 2018-06-01
• 發明（設計）人: 王楠
• 申請（專利權）人: 杭州埃銳晶生物醫學技術有限公司
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76;G01N21/01
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明涉及用于生物檢測分析領域，公開了一種蛋白微陣列檢測用固相基質的制備方法，包括以下具體步驟：選取硬質可透光的基底介質；將波導層材料沉降于所述基底介質表面形成波導模具層，所述波導材料具有和所述基地基底介質大致相同的反射系數；單獨準備由柔性材料制備得到的可透光柔性印章，所述柔性印章的一側表面制備有和所述基底介質上的光柵層相匹配的凹凸光柵結構；將柔性印章的帶有凹凸觀賞結構的一側側面朝向所述波導模具層按壓于所述基底介質的表面并停留，在停留的同時對所述波導模具層進行固化；移除所述柔性印章并在所述基底介質的波導模具層一側制備光疏介質層得到最終固相基質。本發明的優點在于，解決了現有的用于蛋白微陣列檢測的固相基質制作工藝復雜，制作成本高昂的問題，具有較高的應用價值。

技術領域

本發明涉及用于生物檢測分析領領域，特別涉及一種蛋白微陣列檢測用固相基質的制備方法。

背景技術

蛋白微陣列檢測芯片為一種特殊的帶有光學組件的生物芯片類產品，在使用時，待檢測的檢材和基底基質通過特殊工藝結合，可以有效避免液相對于檢測的影響。通過運用平行光導技術對結合在基底介質表面的待檢測物質進行檢測，能夠達到較為理想的靈敏度和特異性。可應用的主要方向為生物體內微量物質的檢測及新型生物標志物探索，如豐度很低的蛋白質及蛋白質修飾。還可以實現體內常規生物標志物的無創檢測，以及基于重組抗原及抗原混合物(如包被細菌及病毒等物質)的檢測(自抗體檢測應用領域)。亦可實現基于雙抗夾心法的芯片類檢測分析。其應用領域主要在生命科學研究，各類臨床體外診斷，個體化診斷，復雜疾病分型等領域。

此蛋白微陣列檢測芯片主要基于平面波導技術，其技術原理包括當光從光密介質進入光疏介質表面時，按照折射定律，當入射角滿足一定條件時，光全部反射回原介質，而沒有投射分量進入光疏介質，這種現象被稱為光的全反射現象。當全反射發生時，雖然透射光的強度為零，但在光疏介質中還存在一個光場，它是由光波場透入到光疏介質內形成的，其振幅隨著透射深度的增加呈指數衰減，因此只有沿著光密和光疏介質表面的很薄的一層，這個波被定義為漸逝波。漸逝波的厚度約為100nm的數量級別，由于生物芯片上的樣品厚度約為幾十納米，因此只有在介質表面的熒光染料才能被激發，而大于此厚度的液相中的雜質則對檢測信號沒有影響，因此可以大幅度提高檢測系統的靈敏度，而不需要復雜的共聚焦光學設備，使用CCD即可實現在picoM-zeptoM(10-1210-21)量級進行檢測。平面光導技術(Planar Wave Guide，PWG)，通過在固相基質(如芯片)中加入光柵結構，利用光學折射與反射原理在固相載體表面形成光導層，激發僅靠近固相表層的熒光物質，不受液相中的雜質干擾，因此可大大降低本底噪音，區分真實信號與背景噪音，提高靈敏度。

平面光導技術的實現需通過在固相基質內刻入特定光柵結構來實現。該過程需通過激光蝕刻工藝介入，其制造成本及高，不易進行大范圍普及。目前在國內還沒有相關機構可以進行生產和應用。

發明內容

本發明針對現有技術中蝕刻特定光柵結構的固相基質的制作工藝復雜，制作成本高，不易進行大范圍普及的缺點，提供了一種蛋白微陣列檢測用固相基質的制備方法。