[發明專利]一種蛋白藥物的發酵生產工藝

在審

• 申請號: 201711320516.4
• 申請日: 2017-12-12
• 公開（公告）號: CN109913483A
• 公開（公告）日: 2019-06-21
• 發明（設計）人: 張英豪;李小靈;孫榮勛;宛佳;高海源;付晶鵬
• 申請（專利權）人: 上海清流生物醫藥科技有限公司
• 主分類號: C12N15/63
• 分類號: C12N15/63;C12N15/12;C12N1/21;C12N1/19;C12N5/10;C07K14/47;C12P21/02
• 代理公司: 北京聯瑞聯豐知識產權代理事務所(普通合伙) 11411
• 代理人: 陳劍聰

1.一種sDSS1蛋白的重組載體，其特征在于，所述重組載體中包含能編碼sDSS1蛋白的基因片段。

2.根據權利要求1所述的sDSS1蛋白的重組載體，其特征在于，所述的sDSS1蛋白包括人、黑猩猩、倭黑猩猩、大猩猩、紅毛猩猩、白頰長臂猿、川金絲猴、恒河猴、滇金絲猴、東非狒狒、安哥拉疣猴、白頂白眉猴、鬼狒、豚尾猴的任一sDSS1蛋白序列，其中人sDSS1的氨基酸序列如SEQ ID NO：1，黑猩猩sDSS1的氨基酸序列如SEQ ID NO：2，倭黑猩猩sDSS1的氨基酸序列如SEQ ID NO：3，大猩猩sDSS1的氨基酸序列如SEQ ID NO：4，紅毛猩猩sDSS1的氨基酸序列如SEQ ID NO：5，白頰長臂猿sDSS1的氨基酸序列如SEQ ID NO：6，川金絲猴sDSS1的氨基酸序列如SEQ ID NO：7,恒河猴sDSS1的氨基酸序列如SEQ ID NO：8，滇金絲猴sDSS1的氨基酸序列如SEQ ID NO：9，東非狒狒sDSS1的氨基酸序列如SEQ ID NO：10，安哥拉疣猴sDSS1的氨基酸序列如SEQ ID NO：11，白頂白眉猴sDSS1的氨基酸序列如SEQ ID NO：12，鬼狒sDSS1的氨基酸序列如SEQ ID NO：13，豚尾猴sDSS1的氨基酸序列如SEQ ID NO：14。

3.根據權利要求2所述的sDSS1蛋白的重組載體，其特征在于，所述的sDSS1蛋白是任一與所述的sDSS1蛋白相似度達到70％以上的蛋白。

4.根據權利要求2所述的sDSS1蛋白的重組載體，其特征在于，所述的sDSS1蛋白是任一以所述的sDSS1蛋白氮端58個氨基酸為基礎，在氮端或碳端融合其他多肽片段，用于融合的多肽片段的結構特征或氨基酸序列特征與所述的sDSS1蛋白碳端31個序列相同或相似的蛋白。

5.根據權利要求2所述的sDSS1蛋白的重組載體，其特征在于，所述的sDSS1蛋白是任一以所述的sDSS1蛋白氮端58個氨基酸為基礎，在氮端或碳端融合其他多肽片段，融合后的蛋白能實現跨膜轉運功能的蛋白。

6.根據權利要求1所述的sDSS1蛋白的重組載體，其特征在于，所述重組載體是大腸桿菌、枯草芽孢桿菌或鏈霉菌的表達質粒，或者是用于大腸桿菌、枯草芽孢桿菌或鏈霉菌的重組DNA片段。

7.根據權利要求1所述的sDSS1蛋白的重組載體，其特征在于，所述載體是酵母菌表達質粒，或者是用于酵母菌的重組DNA片段。

8.根據權利要求1所述的sDSS1蛋白的重組載體，其特征在于，所述載體是用于哺乳動物細胞表達的質粒、慢病毒、腺病毒、腺相關病毒、逆轉錄病毒或桿狀病毒。

9.一種重組工程細胞，其特征在于，所述工程細胞是把權利要求1-8任一所述的sDSS1蛋白的重組載體導入到相應的宿主細胞中構建得到的能表達所述的sDSS1蛋白的重組工程細胞。

10.根據權利要求9所述的重組工程細胞，其特征在于，所述重組工程細胞是大腸桿菌、枯草芽孢桿菌或鏈霉菌，或者能夠在表達產物中摻入非天然氨基酸的大腸桿菌、芽孢桿菌或鏈霉菌的改造細胞。

11.根據權利要求9所述的重組工程細胞，其特征在于，所述重組工程細胞是酵母菌，或者是能夠在表達產物中摻入非天然氨基酸的酵母菌的改造細胞。

12.根據權利要求9所述的重組工程細胞，其特征在于，所述重組工程細胞是人胚腎上皮細胞、中國倉鼠卵巢細胞、小倉鼠腎細胞、猴腎細胞或昆蟲細胞，或者是能夠在表達產物中摻入非天然氨基酸的人胚腎上皮細胞、中國倉鼠卵巢細胞、小倉鼠腎細胞、猴腎細胞或昆蟲細胞的改造細胞。

13.根據權利要求9-12任一所述的重組工程細胞，其特征在于，所述的蛋白表達形式是包涵體。