[發(fā)明專利]一種利用CdTe量子點(diǎn)測(cè)定齊帕特羅的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201711318108.5
• 申請(qǐng)日: 2017-12-12
• 公開（公告）號(hào): CN108037105B
• 公開（公告）日: 2020-08-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 魏益華;張金艷;羅林廣;李瑞麗;賴艷
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 江西省農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全與標(biāo)準(zhǔn)研究所
• 主分類號(hào): G01N21/64
• 分類號(hào): G01N21/64
• 代理公司: 北京三聚陽(yáng)光知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11250
• 代理人: 李敏

本發(fā)明公開一種利用CdTe量子點(diǎn)測(cè)定齊帕特羅的方法，包括：制備CdTe?齊帕特羅抗體；制備包被有齊帕特羅抗原的酶標(biāo)板；向酶標(biāo)板各孔加入系列濃度的齊帕特羅標(biāo)準(zhǔn)溶液和CdTe?齊帕特羅抗體溶液，同時(shí)設(shè)置空白對(duì)照組，溫育、洗滌；測(cè)定酶標(biāo)板中各孔的熒光強(qiáng)度F，空白對(duì)照組的熒光強(qiáng)度為F₀，計(jì)算抑制率I＝(F–F₀)/(F_max?F₀)，以抑制率為縱坐標(biāo)，以齊帕特羅標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度的對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；將待測(cè)樣品與CdTe?齊帕特羅抗體溶液加入酶標(biāo)板，溫育、洗滌，測(cè)定熒光強(qiáng)度，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線，即得待測(cè)樣品中齊帕特羅的濃度。本發(fā)明利用CdTe量子點(diǎn)測(cè)定齊帕特羅，檢測(cè)成本低，檢測(cè)時(shí)間短，靈敏度高，特異性好。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于齊帕特羅定量檢測(cè)領(lǐng)域，具體涉及一種利用CdTe量子點(diǎn)測(cè) 定齊帕特羅的方法。

背景技術(shù)

齊帕特羅，一種新型的β-受體激動(dòng)劑，是一種與克倫特羅(俗稱瘦肉精)、 萊克多巴胺、沙丁胺醇等具有同樣生理效應(yīng)的生長(zhǎng)促進(jìn)劑，屬于違禁藥物， 但其化學(xué)結(jié)構(gòu)卻與常見的β-受體激動(dòng)劑不同，其毒性也是萊克多巴胺的15 倍，能使動(dòng)物體內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)成分由脂肪向肌肉轉(zhuǎn)移，表現(xiàn)出營(yíng)養(yǎng)再分配效應(yīng)， 進(jìn)而調(diào)控動(dòng)物體的物質(zhì)代謝，增強(qiáng)脂肪分解，促進(jìn)蛋白質(zhì)合成，顯著增強(qiáng) 酮體的瘦肉素，能導(dǎo)致人或動(dòng)物肌肉震顫，心臟衰竭，甚至導(dǎo)致死亡，對(duì) 人民群眾的身體健康和生命安全造成危害。

目前對(duì)于齊帕特羅主要的檢測(cè)方法是液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法。該方法靈 敏、準(zhǔn)確性高、假陽(yáng)性率低，但儀器價(jià)格昂貴，樣品前處理復(fù)雜，需要專 業(yè)的技術(shù)人員操作，分析時(shí)間較長(zhǎng)，成本較高。其他的檢測(cè)方法包括酶聯(lián) 免疫檢測(cè)試劑盒和膠體金免疫試紙條，但此方法檢測(cè)靈敏度相對(duì)偏低，且 易受光學(xué)干擾，僅能定性或半定量分析，滿足不了動(dòng)物性食品中違禁藥物 殘留限度要求。

中國(guó)專利文獻(xiàn)CN105738330A中公開了一種利用CdTe量子點(diǎn)檢測(cè)苯乙 醇胺A的方法，該方法以巰基丙酸為穩(wěn)定劑，利用微波輻射加熱方法制備 的CdTe量子點(diǎn)作為熒光探針，基于苯乙醇胺A對(duì)CdTe量子點(diǎn)的熒光強(qiáng)度 增強(qiáng)效應(yīng)，從而建立一種測(cè)定苯乙醇胺A的含量的方法。該方法將CdTe 量子點(diǎn)與待檢測(cè)物質(zhì)苯乙醇胺A在磷酸鹽緩沖液進(jìn)行混合均勻后，采用分 子熒光光度計(jì)對(duì)體系的熒光強(qiáng)度檢測(cè)，即可實(shí)現(xiàn)對(duì)苯乙醇胺A的痕量檢測(cè)。 然而，上述方法的特異性較低，對(duì)其他結(jié)構(gòu)類似物具有較高的交叉反應(yīng)， 造成較高的假陽(yáng)性率，靈敏度較低，上述方法并不適用于齊帕特羅含量的 檢測(cè)。

發(fā)明內(nèi)容

因此，本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于克服現(xiàn)有技術(shù)中不能準(zhǔn)確有效地 檢測(cè)樣品中的齊帕特羅含量，從而提供一種特異性強(qiáng)、靈敏度高、成本較 低的利用CdTe量子點(diǎn)檢測(cè)齊帕特羅的方法。

為此，本發(fā)明提供了一種利用CdTe量子點(diǎn)檢測(cè)齊帕特羅的方法，包 括以下步驟：

S1、將表面具有羧基的CdTe量子點(diǎn)與齊帕特羅抗體偶聯(lián)，得CdTe-齊 帕特羅抗體，備用；

S2、制備包被有齊帕特羅抗原的酶標(biāo)板；

S3、向步驟S2中的酶標(biāo)板的各孔加入經(jīng)緩沖液稀釋的系列濃度的齊帕 特羅標(biāo)準(zhǔn)溶液和CdTe-齊帕特羅抗體溶液，同時(shí)設(shè)置空白對(duì)照組，向所述空 白對(duì)照組中加入緩沖液和CdTe-齊帕特羅抗體溶液，進(jìn)行溫育，然后洗滌酶 標(biāo)板；

S4、測(cè)定步驟S3中洗滌后的酶標(biāo)板中各孔的熒光強(qiáng)度F，空白對(duì)照組 的熒光強(qiáng)度為F₀，計(jì)算抑制率＝(F–F₀)/(F_max-F₀)，以抑制率為縱坐標(biāo)，以 齊帕特羅標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度的對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；

S5、將待測(cè)樣品與CdTe-齊帕特羅抗體溶液加入步驟S2中的所述酶標(biāo) 板中，經(jīng)溫育、洗滌，測(cè)定熒光強(qiáng)度，計(jì)算抑制率，代入所述標(biāo)準(zhǔn)曲線， 定量檢測(cè)所述待測(cè)樣品中齊帕特羅的濃度。