[發明專利]一種利用CdTe量子點測定齊帕特羅的方法有效
| 申請號: | 201711318108.5 | 申請日: | 2017-12-12 |
| 公開(公告)號: | CN108037105B | 公開(公告)日: | 2020-08-04 |
| 發明(設計)人: | 魏益華;張金艷;羅林廣;李瑞麗;賴艷 | 申請(專利權)人: | 江西省農業科學院農產品質量安全與標準研究所 |
| 主分類號: | G01N21/64 | 分類號: | G01N21/64 |
| 代理公司: | 北京三聚陽光知識產權代理有限公司 11250 | 代理人: | 李敏 |
| 地址: | 330200 *** | 國省代碼: | 江西;36 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 利用 cdte 量子 測定 齊帕特羅 方法 | ||
1.一種利用CdTe量子點測定齊帕特羅的方法,其特征在于,包括以下步驟:
S1、將表面具有羧基的CdTe量子點與齊帕特羅抗體偶聯,得CdTe-齊帕特羅抗體,備用;
S2、制備包被有齊帕特羅抗原的酶標板;
S3、向步驟S2中的酶標板的各孔加入經緩沖液稀釋的系列濃度的齊帕特羅標準溶液和CdTe-齊帕特羅抗體溶液,同時設置空白對照組,向所述空白對照組中加入緩沖液和CdTe-齊帕特羅抗體溶液,進行溫育,然后洗滌酶標板;
S4、測定步驟S3中洗滌后的酶標板中各孔的熒光強度F,空白對照組的熒光強度為F0,計算抑制率=(F–F0)/(Fmax-F0),以抑制率為縱坐標,以齊帕特羅標準溶液的濃度的對數為橫坐標,繪制標準曲線;
S5、將待測樣品與CdTe-齊帕特羅抗體溶液加入步驟S2中的所述酶標板中,經溫育、洗滌,測定熒光強度,代入所述標準曲線,定量檢測所述待測樣品中齊帕特羅的濃度。
2.根據權利要求1所述的利用CdTe量子點測定齊帕特羅的方法,其特征在于,所述標準曲線的方程為I=8.5571lgC+73.733,I為抑制率,C為齊帕特羅的濃度,相關系數為R2=0.9943。
3.根據權利要求1所述的利用CdTe量子點測定齊帕特羅的方法,其特征在于,在S1步驟中,所使用的CdTe量子點溶液的濃度為1-1.5×10-4mol/L,所使用的齊帕特羅抗體溶液的濃度為0.3-0.7mg/mL;所述CdTe量子點溶液與齊帕特羅抗體溶液的體積比為0.5-3:1。
4.根據權利要求1所述的利用CdTe量子點測定齊帕特羅的方法,其特征在于,所述CdTe-齊帕特羅抗體的熒光激發波長λex=350nm,熒光發射波長λem=550nm。
5.根據權利要求1-4任一項所述的利用CdTe量子點測定齊帕特羅的方法,其特征在于,在S2步驟中,所使用的包被介質包括CBS緩沖溶液、PBS緩沖溶液、PBST緩沖溶液或Tris-HCl緩沖溶液。
6.根據權利要求5所述的利用CdTe量子點測定齊帕特羅的方法,其特征在于,所述包被介質的濃度為0.01-0.05mol/L,pH值為7.4-9.6。
7.根據權利要求6所述的利用CdTe量子點測定齊帕特羅的方法,其特征在于,所述包被介質為濃度為0.05mol/L、pH=9.6的CBS緩沖溶液。
8.根據權利要求1-4任一項所述的利用CdTe量子點測定齊帕特羅的方法,其特征在于,在S2步驟中,齊帕特羅抗原的包被時間為8-12小時。
9.根據權利要求8所述的利用CdTe量子點測定齊帕特羅的方法,其特征在于,包被時間為10小時。
10.根據權利要求1-4任一項所述的利用CdTe量子點測定齊帕特羅的方法,其特征在于,在S2步驟中,所使用的封閉液為質量濃度為0.8-1.2%的OVA。
11.根據權利要求10所述的利用CdTe量子點測定齊帕特羅的方法,其特征在于,為1.0%的OVA。
12.根據權利要求1-4任一項所述的利用CdTe量子點測定齊帕特羅的方法,其特征在于,在S3步驟中,所述的緩沖液為pH值為6.5-7.8的PBS緩沖液。
13.根據權利要求12所述的利用CdTe量子點測定齊帕特羅的方法,其特征在于,所述pH值為7.4。
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