[發明專利]一種促進脫套傷及撕脫傷皮膚成活的膠原蛋白材料

在審

• 申請號: 201711313526.5
• 申請日: 2017-12-12
• 公開（公告）號: CN108014370A
• 公開（公告）日: 2018-05-11
• 發明（設計）人: 呂振木;呂欣;張英澤;申勇;王秋生;趙偉超
• 申請（專利權）人: 呂振木
• 主分類號: A61L27/24
• 分類號: A61L27/24;A61L27/36;A61L27/56;A61L27/60;A61L27/58;C12P21/06;C07K14/78;C07K1/30
• 代理公司: 北京東方盛凡知識產權代理事務所(普通合伙) 11562
• 代理人: 楊潤

1.一種促進脫套傷及撕脫傷皮膚成活的膠原蛋白材料，是由膠原蛋白海綿和營養液組成，其特征在于：是將牛跟腱、豬跟腱為原料經過酶解、純化步驟精提取制得的膠原蛋白，經過交聯冷凍干燥處理后形成膠原蛋白海綿，以及營養液。

2.根據權利要求1所述的一種促進脫套傷及撕脫傷皮膚成活的膠原蛋白材料，其特征在于：

所述膠原蛋白海綿是經以下步驟制得：

①前處理：將牛跟腱、豬跟腱剔除外殼，去除脂肪組織、肌肉和其他雜質，用自來水清洗5遍，用去離子水清洗5遍，再用75％酒精浸泡30min消毒處理；切成1cm×1cm的組織小塊后放入高速組織搗碎機中搗碎成糊狀，轉速為10000～12000r/min，然后用含4.5mol/L NaCl的0.05mol/L Tris-HCl緩沖液(pH 7.5)充分洗滌以去除脂質及血清等成分，最后低溫離心，離心轉速為8000r/min，離心時間為30min，離心溫度為4℃；

②酶解：加入酶解液，攪拌并維持在4℃，提取72h，用磁力攪拌器充分攪拌后離心，所得上清液膠原蛋白原液；

所述酶解液為含胃蛋白酶500mg的0.5mol/L冰醋酸，所述酶解液的用量為：需酶解物質：酶解液＝1：10(V：V)；

離心轉速為4000r/min，離心時間為20min，離心溫度為4℃；

③純化：將濃度為4.4mol/的NaCl溶液加入膠原蛋白原液中，持續攪拌直至白色絮狀沉淀從溶液中析出，繼續加入NaCl溶液直至沉淀不在析出為止，在4℃，5000r/min的轉速下離心20min后獲得白色沉淀物；在該白色沉淀物中加入濃度為0.5mol/L的醋酸溶液中溶解；將溶解后的膠原蛋白溶液繼續反復進行鹽析處理，重復本步驟2～4次；

④交聯：將純化后的膠原蛋白以交聯劑交聯3h得膠原蛋白海綿，所述交聯劑采用0.30％的DPPA(疊氮磷酸二苯酯)的二甲基甲酰胺溶液；

⑤干燥：將教練后的膠原蛋白海綿置于真空冷凍干燥機中進行冷凍干燥48h，溫度為-30～-40℃，真空度為6～4Pa；

⑥滅菌：采用鈷60輻射滅菌。

3.根據權利要求1所述的一種促進脫套傷及撕脫傷皮膚成活的膠原蛋白材料，其特征在于：所述營養液是酸性生長因子，優選酸性成纖維細胞生長因子。