[發明專利]一種提高文庫構建試劑穩定性的方法

在審

• 申請號: 201711313523.1
• 申請日: 2017-12-12
• 公開（公告）號: CN108424904A
• 公開（公告）日: 2018-08-21
• 發明（設計）人: 金晶;王西龍
• 申請（專利權）人: 南京迪格諾斯生物技術有限公司
• 主分類號: C12N9/96
• 分類號: C12N9/96
• 代理公司: 南京常青藤知識產權代理有限公司 32286
• 代理人: 金迪

1.一種提高文庫構建試劑穩定性的方法，其特征在于，將文庫構建所需要的工具酶進行如下步驟處理：

S1：將工具酶進行納米膠囊封裝保存，封裝的方法包括原位聚合封裝方法和通過電荷吸附的自交聯的封裝中的一種；

S2：使用時，加入降解交聯劑的化學試劑，破壞納米膠囊使工具酶具有活性。

2.根據權利要求1所述的提高文庫構建試劑穩定性的方法，其特征在于，將步驟S1中所述的工具酶進行封裝后，得到液體產品與工具酶反應所需要的Buffer液按一定比例混合進行凍干處理得到凍干粉，保存待用。

3.根據權利要求1或2所述的提高文庫構建試劑穩定性的方法，其特征在于，步驟S1中所述的原位聚合封裝方法如下：

1)：加一定量的N-丙烯酰氧基琥珀酰亞胺到工具酶中，使工具酶被N-丙烯酰氧基琥珀酰亞胺丙烯酰化；

2)：以過硫酸銨和N,N,N`,N`-四甲基乙二胺為引發劑，加入一定量的引發劑到步驟1)中所得到的丙烯酰化的工具酶的表面引發自由基聚合；

3)：加入一定量的N-(3-氨基丙基)甲基丙烯酰胺、丙烯酰胺和交聯劑的混合物到步驟2)中所得到的反應物中，反應時間大于60分鐘得到納米膠囊包裹的工具酶，其中交聯劑為二甲基丙烯酸甘油酯和雙(2-甲基丙烯)乙氧基二硫中的一種；

4)：用凝膠過濾柱分離純化得到包裹有納米膠囊的成品工具酶。

4.根據權利要求3所述的提高文庫構建試劑穩定性的方法，其特征在于，使用交聯劑是二甲基丙烯酸甘油酯時，則使交聯劑降解的化學試劑是低pH的緩沖液；使用交聯劑是雙(2-甲基丙烯)乙氧基二硫時，則使交聯劑降解的化學試劑是DTT(二硫蘇糖醇)。

5.根據權利要求3所述的提高文庫構建試劑穩定性的方法，其特征在于，N-(3-氨基丙基)甲基丙烯酰胺、丙烯酰胺和交聯劑的混合物的混合摩爾比是3:7:1。