[發明專利]親和層析柱、制備方法及應用有效
| 申請號： | 201711312415.2 | 申請日： | 2017-12-11 |
| 公開（公告）號： | CN107855115B | 公開（公告）日： | 2020-06-02 |
| 發明（設計）人： | 徐曉勇;宋秀麗;梅曉璐 | 申請（專利權）人： | 杭州華安生物技術有限公司 |
| 主分類號： | B01J20/24 | 分類號： | B01J20/24;B01J20/291;B01J20/30;B01D15/38;C07K1/22;G01N27/447 |
| 代理公司： | 北京超凡志成知識產權代理事務所(普通合伙) 11371 | 代理人： | 李進 |
| 地址： | 310000 浙江省杭州市西湖*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 親和 層析 制備 方法 應用 | ||
【權利要求書】：
1.一種親和層析柱的制備方法，其特征在于，包括：將抗原、還原劑與層析柱填料在層析柱空柱中進行孵育反應，得到反應柱，對反應柱進行洗滌，并對反應柱中多余的結合位點進行封閉處理，得到親和層析柱；
抗原為HSP27，還原劑為二硫蘇糖醇、巰基乙醇或三(2-羧乙基)膦，層析填料為瓊脂糖凝膠，層析柱填料可與巰基偶聯。
2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述瓊脂糖凝膠為碘乙酰活化的瓊脂糖凝膠或環氧基活化的瓊脂糖凝膠。
3.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述抗原與還原劑的重量份數比為1-2:2。
4.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述抗原和還原劑體積與層析柱填料體積的體積比為2-3:2。
5.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，所述孵育反應包括：將抗原、還原劑和層析柱填料混合均勻后，輕搖反應1-2h。
6.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，封閉處理中所用封閉液為半胱氨酸溶液。
7.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于，當所述抗原為非水溶性抗原時，先用4-6mol/L的尿素對所述非水溶性抗原進行溶解，再參與孵育反應。
8.如權利要求1-7任一項所述的制備方法在制備親和層析柱中的應用。
9.一種親和層析柱，其特征在于，應用權利要求1-7任一項所述的制備方法制備得到。
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