[發明專利]一種重組溶瘤痘苗病毒及其制備方法與應用在審
| 申請號: | 201711310440.7 | 申請日: | 2017-12-11 |
| 公開(公告)號: | CN108165536A | 公開(公告)日: | 2018-06-15 |
| 發明(設計)人: | 錢文斌;雷文;王世兵 | 申請(專利權)人: | 浙江大學 |
| 主分類號: | C12N7/01 | 分類號: | C12N7/01;A61K48/00;A61K35/768;A61P35/00 |
| 代理公司: | 杭州求是專利事務所有限公司 33200 | 代理人: | 黃歡娣;邱啟旺 |
| 地址: | 310058 浙江*** | 國省代碼: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 溶瘤 痘苗病毒 全長抗體 制備 腫瘤細胞 痘苗病毒基因組 痘苗病毒載體 病毒 抗腫瘤效果 特異性復制 惡性B細胞 激活T細胞 抑制T細胞 編碼序列 病毒復制 病毒療法 病毒治療 高效表達 基因療法 基因治療 淋巴腫瘤 免疫應答 溶瘤病毒 殺傷能力 相關基因 胸腺嘧啶 異常增殖 有效結合 激酶 核苷 裂解 抑瘤 應用 復制 細胞 基因 | ||
1.一種重組溶瘤痘苗病毒,其特征在于,所述病毒的胸腺嘧啶核苷激酶(TK)區包含SEQID NO.1所示的PD1全長抗體的編碼序列。
2.一種權利要求1所述的重組溶瘤痘苗病毒的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
(1)合成人全長PD-1單克隆抗體,其基因序列如SEQ ID NO.1所示;
(2)擴增全長PD-1單克隆抗體,酶切后亞克隆至痘苗病毒穿梭質粒(pTK)的TK區中,構建出重組質粒pCB-aPD1。其中,aPD1基因由痘苗病毒的早/晚期啟動子(P-se/l)控制。
(3)采用基因同源重組的方式,將pCB-aPD1質粒轉染到已經被感染了野生型痘苗病毒的細胞中,使兩者同源重組,產生重組痘苗病毒VV-aPD1。經篩選后,獲得所述TK區包含SEQID NO.1所示的PD1全長抗體的編碼序列的重組溶瘤痘苗病毒。
3.一種權利要求1所述的重組溶瘤痘苗病毒在制備治療治療B細胞淋巴腫瘤的藥物中的應用。
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